[发明专利]一种大孔改性蛋清细胞培养支架材料的制备方法

摘要

本发明涉及一种大孔改性蛋清细胞培养支架材料的制备方法，包括以下步骤配制质量百分比浓度为20％的P(MVE‑alt‑MAH)水溶液，取质量百分比浓度为10％的碳酸氢钠溶液，缓慢滴加到P(MVE‑alt‑MAH)水溶液中，调节pH为5‑6，反应加入1‑乙基‑(3‑甲基氨基丙基)碳酰二亚胺活化；再加N‑羟基琥珀酰亚胺反应(3)调节pH7.2，再加入2mL鸡蛋清进行交联；(4)滴入PBS溶液，将多余小分子脲吸出去除，即得。硬度梯度容易控制，所形成的皱褶和密集的大型孔洞利于细胞的黏附生长。制备过程简单，材料经济，易于实现，蛋清本身可以给细胞提供一定的营养支持，不涉及采用高温高压装置，安全无毒副作用。

主权项

一种大孔改性蛋清细胞培养支架材料的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）配制质量百分比浓度为20%的P(MVE‑alt‑MAH)水溶液， 取0.025~0.2g的P(MVE‑alt‑MAH)水溶液加入反应器皿中；（2）取质量百分比浓度为10%的碳酸氢钠溶液，缓慢滴加到P(MVE‑alt‑MAH)水溶液中，调节pH为5‑6，反应10‑15 min；加入1‑乙基‑（3‑甲基氨基丙基）碳酰二亚胺活化15‑20 min；再加N‑羟基琥珀酰亚胺反应15‑20 min；1‑乙基‑（3‑甲基氨基丙基）碳酰二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺的质量比为1:1；（3）调节pH7.2，再加入2 mL鸡蛋清进行交联，充分振荡或搅拌后静置，25~37℃下充分交联反应完全；（4）将步骤（3）得到的大孔改性蛋清细胞培养支架材料用注射器逐滴滴入PBS溶液，静止12 h，使其中的多余小分子脲吸出去除，重复若干次；（5）将步骤（4）得到的大孔改性蛋清细胞培养支架材料置于细胞超净工作台，紫外照射杀菌即获得用于细胞培养的大孔改性蛋清培养支架材料。