[发明专利]一种pH值稳定的淋巴细胞无血清培养基及其制备方法和应用

摘要

本发明提供了一种pH值稳定的淋巴细胞无血清培养基，由基础培养基、转铁蛋白10mg/L转铁蛋白、0.01mg/L亚硒酸钠、110mg/L丙酮酸、1.5mg/L乙醇胺、10mg/L胰岛素、10mg/L‑30mg/L谷氨酰胺替代物、300mg/L脂质型牛血清蛋白、0.001mg/L硫酸铜、0.0005mg/L偏钒酸铵、0.00005mg/L二氯化锰、0.8mg/L硫酸锌、2mg/L维生素E、100mg/L植物血球凝集素(PHA)和10‑50mMpH缓冲系统组成。本发明还提供该培养基的制备方法和应用。本发明的培养基能提高淋巴细胞分化，得到大量处于分裂相的淋巴细胞，且pH值稳定，利于培养基的稳定保存。

主权项

1.一种pH值稳定的淋巴细胞无血清培养基，由基础培养基、转铁蛋白、亚硒酸钠、丙酮酸、脂质型牛血清蛋白、硫酸铜、偏钒酸铵、二氯化锰、硫酸锌、维生素E和其他成分组成，所述各成分的浓度分别为：所述转铁蛋白10mg/L；所述丙酮酸110mg/L；所述脂质型牛血清蛋白300mg/L；所述硫酸铜0.001mg/L；所述偏钒酸铵0.0005mg/L；所述二氯化锰0.00005mg/L；所述硫酸锌0.8mg/L；所述维生素E 2mg/L；所述基础培养基为1640培养基；其特征在于，所述其他成分组成为：乙醇胺、胰岛素、谷氨酰胺替代物、植物血球凝集素和pH缓冲系统；所述亚硒酸钠0.01mg/L；所述乙醇胺1.5mg/L；所述胰岛素10mg/L；所述谷氨酰胺替代物10mg/L‑30mg/L；所述植物血球凝集素100mg/L；所述pH缓冲系统10‑50mM；所述pH缓冲系统为甘油磷酸钠/PBS缓冲系统，所述甘油磷酸钠/PBS缓冲系统由质量体积浓度为2g/L的磷酸氢二钠，质量体积浓度为1g/L的磷酸二氢钾，质量体积浓度为9g/L的甘油磷酸钠组成；所述谷氨酰胺替代物为丙氨酰谷氨酰胺和蛋氨酸脑啡肽的混合物，所述丙氨酰谷氨酰胺和所述蛋氨酸脑啡肽的浓度比例为1:1，所述丙氨酰谷氨酰胺的浓度为10mg/L，所述蛋氨酸脑啡肽的浓度为10mg/L。