[发明专利]一种用于神经突触形成分析中的细胞共培养方法有效
| 申请号： | 201510450630.3 | 申请日： | 2015-07-28 |
| 公开（公告）号： | CN105062971B | 公开（公告）日： | 2018-07-13 |
| 发明（设计）人： | 阳小飞;蒋伟;陈健;王明明;龚吉红;梅颖 | 申请（专利权）人： | 中南民族大学 |
| 主分类号： | C12N5/0793 | 分类号： | C12N5/0793;C12N5/071;G01N33/533 |
| 代理公司： | 武汉华旭知识产权事务所 42214 | 代理人： | 刘天钰 |
| 地址： | 430074 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种用于神经突触形成分析中的细胞共培养方法，包括以下步骤：将传代培养的非神经元细胞即HEK293 T细胞加入到体外环境中24孔原代培养的神经元细胞中，混合后培养24小时以上；采用PEI转染法，转染HEK293 T细胞，每个孔中所转染的外源基因均不相同，被转染后的HEK293 T细胞过表达外源基因，在此条件下进行共培养48小时以上；免疫染色突触前的标记蛋白synapsin，从而判断每一孔中是否形成突触结构。本发明所提供的共培养方法解决了现有技术中的不足，该方法操作简单、方便，成本相对较低，耗时短，可以很好的筛选基因及验证基因功能，可以广泛用于实验室。 | ||
| 搜索关键词： | 转染 细胞共培养 神经突 突触 表达外源基因 非神经元细胞 神经元细胞 标记蛋白 传代培养 免疫染色 筛选基因 外源基因 验证基因 原代培养 转染法 体外 耗时 分析 | ||
【主权项】：
1.一种用于神经突触形成分析中的细胞共培养方法，其特征在于包括以下步骤：(1)、将传代培养的非神经元细胞即HEK293 T细胞加入到体外环境中24孔原代培养的神经元细胞中，混合后培养24小时以上；(2)、采用PEI转染法，转染HEK293 T细胞，每个孔中所转染的外源基因均不相同，每万个HEK293 T细胞中所添加的PEI为1μ g，被转染后的HEK293 T细胞过表达外源基因，在此条件下进行共培养48小时以上；(3)、免疫染色突触前的标记蛋白synapsin，从而判断每一孔中是否形成突触结构。
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