[发明专利]一种快速鉴别金钱白花蛇的TaqMan探针引物混合物、试剂盒和荧光定量PCR检测方法

摘要

本发明提供一种快速鉴别金钱白花蛇及其伪品的TaqMan探针引物组合物、试剂盒和qPCR检测方法及应用。本发明基于线粒体DNA（mtDNA）具有灵敏度高、精确度好、快速、降解小、稳定容易操作等优势，因此作为目标靶基因；而且本发明通过设计人工合成一段竞争型阳性扩增内标，在体系中加入其特异性探针并与靶基因共用一对引物，能有效指示假阴性出现；双重多色荧光定量PCR是在同一管内检测，具有准确稳定、操作简单，灵敏度极高，特异性强，通量大等有益效果，特别适用于鉴定因加工而导致DNA含量少、高度降解的中药真伪的鉴定，为食品药品中动物源性成分的鉴定探索了新的途径。

主权项

一种用于鉴别金钱白花蛇的TaqMan探针引物组合物，其特征在于：包括1对特异性引物和1对特异性探针：Bmvp‑COIF1上游引物：5'  CTGGTCTAATCGGAGCCTGT  3'；Bmvp‑COIR1下游引物：5'  ATAAATGCGTGGGCAGTAAC  3' ；如SEQ ID NO.2、3所示；所述特异性探针的核苷酸序列如下所示：5' AGAGTTAACCCAACCCGGCTCGCTTTTA 3'，如SEQ ID NO.4所示；探针的5'端修饰有FAM荧光基团，3'端修饰有BHQ2猝灭基团。