[发明专利]一种基于AuNPs-PDDA-GR复合材料的癌胚抗原电化学免疫传感器的制备方法及应用

摘要

本发明涉及一种基于AuNPs-PDDA-GR复合材料的癌胚抗原电化学免疫传感器的制备方法及应用，属于电化学免疫传感技术领域。以K₃Fe(CN)₆/K₄Fe(CN)₆ 为电化学探针，以AuNPs-PDDA-GR复合材料为基底材料，基于其良好的生物相容性和稳定性，大的比表面积大，优异的导电性等优点，显著提高了免疫传感器的稳定性和灵敏度。该传感器用于癌胚抗原的检测，检测线性范围0.1pg/mL~10ng/mL，检出限0.05pg/mL。

主权项

一种基于AuNPs‑PDDA‑GR复合材料的癌胚抗原电化学免疫传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)用1.0 μm、0.3 μm、0.05 μm的Al₂O₃抛光粉依次打磨直径为4 mm的玻碳电极(GCE)，分别在乙醇和超纯水中超声清洗3 min，氮气吹干，取10 μL AuNPs‑PDDA‑GR分散液滴涂到电极表面，室温下晾干成膜，用PBS(pH 7.4) 缓冲溶液冲洗以除去未键合的AuNPs‑PDDA‑GR得到AuNPs‑PDDA‑GR/GCE；(2)取50 μL 1~2.5 μg/mL的癌胚抗原抗体(anti‑CEA)标准溶液滴涂到电极表面，在4 ℃冰箱中孵育12 h，用PBS(pH 7.4)缓冲溶液冲洗除去物理吸附得到anti‑CEA/AuNPs‑PDDA‑GR/GCE；(3)取50 μL 质量分数为1~3%的牛血清白蛋白(BSA)溶液滴涂到电极表面，在37 ℃下孵育1 h，以封闭非特异性结合位点，用PBS(pH 7.4)缓冲溶液冲洗电极表面得到BSA/anti‑CEA/AuNPs‑PDDA‑GR/GCE；(4)滴加50 μL浓度为0.1 pg/mL~10ng/mL的一系列不同浓度的癌胚抗原标准溶液用于与抗体特异性识别，在37 ℃下孵育60 min，用PBS(pH 7.4)缓冲溶液冲洗电极表面，制得一种基于AuNPs‑PDDA‑GR复合材料的癌胚抗原电化学免疫传感器(CEA/BSA/anti‑CEA/AuNPs‑PDDA‑GR/GCE)。