[发明专利]一种利用猪血红蛋白制取抗菌肽的方法

摘要

本发明公开了一种利用猪血红蛋白制取抗菌肽的方法，包括以下步骤：将猪全血分离得猪血球，再将猪血球溶血、酶解、脱色、超滤、真空浓缩、冻干，即得抗菌肽；所述胰蛋白酶的加酶量是3000U／g，在pH8、温度45℃～55℃条件下，酶解反应时间4～6h。本发明的利用猪血红蛋白制取抗菌肽的方法，成本低、效果好。

主权项

一种利用猪血红蛋白制取抗菌肽的方法，其特征是包括以下步骤：（1）采集新鲜猪血，以5g／L的柠檬酸钠抗凝，在4℃、8000r／min离心10min，收集下层沉淀，以获得红血球；在红血球中加入同等体积的蒸馏水，超声波细胞破碎辅助溶血20min，然后在4℃、4000r／min离心10min，得到血红蛋白溶液，于4℃保存备用；（2）取适量血红蛋白溶液，加入一定量的胰蛋白酶酶解，搅拌，1mol/LNaoH溶液维持体系pH8.0，45‑55℃，4‑6h；将酶解反应产物迅速升温至85℃并保持此温度10 ～ 15 分钟，再迅速冷却至0 ～ 30℃以终止酶解反应，调节pH值至7.0左右，8000r／min离心15min，获得上清酶解液，4℃冷藏备用；（3）活性炭用量为酶解液总重的5‑30％，温度55℃，搅拌脱色20‑30min ；再进行粗滤处理后得粗滤酶解液；将粗滤酶解液在0.1～0.2Mpa 的工作压力和0～45℃的工作温度下，采用截留分子质量为10kD超滤膜进行超滤处理，以除去大分子蛋白类物质，得超滤酶解液；再将超滤酶解液依次进行真空浓缩、冷冻干燥，得抗菌肽，‑20℃保存。