[发明专利]用于制备shRNA的引物及制备方法、载体及构建方法有效
| 申请号： | 201510505278.9 | 申请日： | 2015-08-17 |
| 公开（公告）号： | CN105132413B | 公开（公告）日： | 2018-06-19 |
| 发明（设计）人： | 苟德明;康康;李洁璇;黄炼 | 申请（专利权）人： | 深圳大学 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/113;C12N15/10;C12N15/867;C12N15/66 |
| 代理公司： | 深圳市恒申知识产权事务所(普通合伙) 44312 | 代理人： | 王利彬 |
| 地址： | 518060 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开一种用于制备shRNA的引物及制备方法、载体及构建方法，用于制备shRNA的引物包括引物P1、P2、P3；P1长度为34nt，从5’端开始，依次为突出的粘性末端ACCG，21nt的siRNA正向序列，loop序列，以及与siRNA正向序列3’末端3个碱基反向互补的碱基；P2，5’端4个碱基由ACCG改变为AAAA，其余序列与P1相同；P3是siRNA正向序列5’末端18nt序列的反向互补序列。三条引物长度均不超过35nt，可有效避免长引物合成过程中发生的碱基错误，提高了shRNA的保真性，成本低，适用于高通量制备shRNA。 1 | ||
| 搜索关键词： | 制备 引物 碱基 正向序列 构建 反向互补序列 反向互补 合成过程 粘性末端 保真性 长引物 高通量 | ||
【主权项】：
1.一种用于制备shRNA的引物，其特征在于，包括三条引物P1、P2、P3；引物P1长度为34nt，从5’端开始，依次为突出的粘性末端ACCG，21nt的siRNA正向序列，loop序列，以及与siRNA正向序列3’末端3个碱基反向互补的碱基；引物P2，5’端4个碱基由ACCG改变为AAAA，其余序列与P1相同；引物P3是siRNA正向序列5’末端18nt序列的反向互补序列；其中，loop序列为CTCGAG或TTCAAGAGA。
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