[发明专利]一种昆虫鞘翅石蜡切片方法有效
申请号: | 201510505600.8 | 申请日: | 2015-08-14 |
公开(公告)号: | CN105181406B | 公开(公告)日: | 2018-04-03 |
发明(设计)人: | 马玉堃;刘雪峰;李玲;王洪峰;沙依拉·帕那西 | 申请(专利权)人: | 东北林业大学 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N1/30 |
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地址: | 150040 黑龙江省哈*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 一种昆虫鞘翅石蜡切片方法1、把鞘翅目昆虫在蛹期区分雌、雄,羽化后取其鞘翅用于石蜡切片;2、鞘翅固定将步骤1所得到的鞘翅要观察的部分剪切好,用FAA固定剂固定;3、鞘翅脱水把固定的鞘翅组织用不同体积浓度的酒精依次脱水;4、鞘翅透明将脱水的鞘翅放入到无水酒精和二甲苯的溶液中透明,再放入二甲苯中透明;5、鞘翅浸蜡将透明过的鞘翅放入55℃、软石蜡和二甲苯溶液中3小时;再放入65℃,硬石蜡和二甲苯溶液3小时;65℃恒温再过度浸蜡6小时;6、包埋与切片;7、展片、粘片与拷片;8、脱蜡复水;9、染色后封片。采用本发明的方法处理后的鞘翅石蜡切片,完整率高,能够满足研究其显微和超微结构的要求。 | ||
搜索关键词: | 一种 昆虫 鞘翅 石蜡 切片 方法 | ||
【主权项】:
一种昆虫鞘翅石蜡切片方法,其特征在于,方法如下:步骤(1)把鞘翅目昆虫在蛹期区分雌、雄,羽化后在36‑48小时间取其鞘翅用于石蜡切片;步骤(2)鞘翅固定:将步骤(1)所得到的鞘翅要观察的部分剪切好,用FAA固定剂固定24小时;步骤(3)鞘翅脱水:把固定的鞘翅组织用不同体积浓度的酒精依次脱水,脱水浓度与时间依次为:50%1‑2小时、70%1‑2小时、80%30分钟、90%30分钟、纯酒精20分钟、纯酒精10分钟;步骤(4)鞘翅透明:将脱水的鞘翅放入到无水酒精和二甲苯的混合液中透明1‑2小时,软石蜡和二甲苯混合液按体积配比=1∶1,透明1‑2小时,再放入二甲苯中1小时;步骤(5)鞘翅浸蜡:将透明过的鞘翅放入到55℃、已经融化的软石蜡和二甲苯混合液中3小时,软石蜡和二甲苯混合液按体积配比=1∶1;再放入到65℃、已经融化的硬石蜡和二甲苯混合液中3小时,硬石蜡和二甲苯混合液按体积配比=1∶1;65℃恒温再过度浸蜡6小时;步骤(6)包埋与切片:取出鞘翅,在伯口纸盒中凝固成型后切片;步骤(7)展片、粘片与拷片;步骤(8)脱蜡复水;步骤(9)染色后封片。
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