[发明专利]鉴定化妆品中驴、马及牛源性成分的引物、探针组合物、试剂盒及多重荧光PCR检测方法

摘要

本发明公开了一种快速鉴定化妆品中驴、马及牛源性成分的引物、探针组合物以及包含该引物、探针组合物的试剂盒，该引物、探针组合物包括一对通用引物和四种Taqman探针，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1～7所示。本发明还公开了一种鉴定化妆品中驴、马及牛源性成分的多重荧光PCR检测方法，包括以下步骤：取待检测样品，提取DNA，然后利用上述引物、探针组合物或试剂盒对DNA进行PCR扩增，收集荧光信号，根据荧光信号判断待检测样品中是否含有驴、马及牛源性成分。本发明的检测技术，可有效避免PCR反应中假阴性结果，具有准确、稳定、操作简单、灵敏度极高、特异性强等优点。

主权项

鉴定化妆品中驴、马及牛源性成分的引物、探针组合物，其特征在于：包括以下引物和探针，其核苷酸序列如下：（1）引物  通用引物：上游引物: 5'  AGACGAGAAGACCCTATGGAG  3'；             下游引物: 5'  CTCCGAGGTCACCCCAA  3'；（2）探针：驴特异探针(LP)：5’  CACAAAAAATAATATACAAACCTAACCTCCAG  3’；马特异探针(MP)：5’  CAACACACAAACCTAACCTTCAGGGA  3’；牛特异探针(NP)：5’   CCAACCCAAAGAGAATAAATTTAACCATTA  3’；内标探针(16sP)：5'  AAGTACGCTCCATTGGTGACCTCATTTC  3'；其中，所有探针的5’端修饰有荧光报告基团，所述荧光报告基团采用5种发光基团为FAM，JOE，CY3，CY5，ROX中的任意4种不同发光基团分别对各个探针的5’端进行荧光修饰，所有探针的3’端修饰有淬灭基团，可以为TAMRA、BHQ1或BHQ2中的一种或两种。