[发明专利]一种NT-proBNP荧光免疫试剂及其制备方法

摘要

本发明涉及一种NT‑proBNP荧光免疫试剂及其制备方法，属于医学检验测定技术领域。所述NT‑proBNP荧光免疫试剂包括标记用NT‑proBNP1抗体、标记用羊抗鸡IgY抗体、包被用NT‑proBNP2抗体、包被用鸡IgY抗体、粒子重悬液、样品垫处理液，粒子重悬液：含100‑200mM Tris的Tris‑HCl重悬液(含250‑500μg/ml鼠IgG，1‑5％小牛血清，0.1‑0.5％Pluronic F68，0.5‑1％酪蛋白，0.9％NaCl，0.05％NaN₃)，pH 8‑9；样品垫处理液：10mM PBS(含0.1mg/ml‑0.5mg/ml植物凝集素)，pH 7‑8。并具体公开了NT‑proBNP荧光免疫试剂的制备方法，包括特定的粒子标记、样品垫预处理、抗体在NC膜上的包被、以及试纸组装。本发明的NT‑proBNP荧光免疫试剂灵敏度较高、应用范围广泛，可降低血清实验中的干扰，对红细胞具有更好的拦截效果。

主权项

一种NT‑proBNP荧光免疫试剂，其特征在于，所述NT‑proBNP荧光免疫试剂包括标记用NT‑proBNP1抗体、标记用羊抗鸡IgY抗体、包被用NT‑proBNP2抗体、包被用鸡IgY抗体、粒子重悬液、样品垫处理液，其中粒子重悬液：含100‑200mM Tris的Tris‑HCl重悬液，pH 8‑9；样品垫处理液：10mM PBS，pH 7‑8；所述的NT‑proBNP荧光免疫试剂的制备方法包括粒子标记、样品垫预处理、抗体在NC膜上的包被、以及试纸组装，其中，粒子标记为在粒子中同时加入EDC、NHS、BSA，以及NT‑proBNP1抗体或羊抗鸡IgY抗体，在45‑55℃下交联反应2h；交联后先清洗、乙醇胺封闭，然后用粒子重悬液重悬分别得NT‑proBNP1抗体标记的荧光粒子和羊抗鸡IgY抗体标记的荧光粒子，最后将NT‑proBNP1抗体标记的荧光粒子和羊抗鸡IgY抗体标记的荧光粒子混合得到粒子浓度分别为0.1‑0.5mg/ml和0.001‑0.01mg/ml的粒子混合液。