[发明专利]一种抗菌肽菌丝霉素成膜剂及其制备方法与应用

摘要

本发明公开一种抗菌肽菌丝霉素成膜剂及其制备方法与应用。本发明将抗菌肽菌丝霉素制成抗菌肽菌丝霉素膜剂，不仅工艺简单，包封率高，稳定性好，成本低廉，可进行大规模化生产，而且抗菌肽菌丝霉素膜剂可以直接起到保护作用，迅速杀死细菌，防止炎症进一步感染，对感染有很好的治疗。本发明抗菌肽菌丝霉素成膜剂对上述奶牛产奶量、乳蛋白含量、乳糖含量、乳脂率及非脂乳固体含量的影响均无显著性差异，抗菌肽菌丝霉素成膜剂应用于奶牛隐形乳房炎有显著的预防效果。

主权项

一种抗菌肽菌丝霉素成膜剂的制备方法，其特征在于，包括步骤：A、抗菌肽菌丝霉素的表达载体的构建将菌丝霉素基因序列插入毕赤酵母表达载体，得到重组质粒；对重组质粒进行限制性酶切后电转到毕赤酵母中，然后在毕赤酵母中用培养基进行培养后，筛选出阳性转化子；将上述阳性转化子进行摇床培养，然后将摇床培养后的部分菌液进行诱导培养，培养后再离心，收集上清液，得到菌丝霉素发酵液；B、抗菌肽菌丝霉素成膜剂的制备取1~3 mL菌丝霉素发酵液，加入PVA充分搅拌、溶胀，加热溶解和过筛网，然后将得到的滤液于常温下静置；在静置后的滤液中加入Tween‑80和甘油，充分搅拌后，待常温，加入氮酮，搅拌均匀，最后加入用无水乙醇浸润的CMC‑Na，充分搅拌直至完全溶解，得到抗菌肽菌丝霉素成膜剂；其中，PVA: Tween‑80: 甘油: CMC‑Na按体积比为3~6: 1.4~1.6: 5~8: 1.9~2.1。