[发明专利]一种检测人类PEAR1基因多态性的试剂盒及其应用

摘要

本发明涉及一种检测人类PEAR1基因多态性的试剂盒及其应用。本发明盒体内的物质包括检测PEAR1基因上的rs2768759号位点的特异性引物及特异性荧光探针、rs12041331号SNP位点的特异性引物及特异性荧光探针、Taq DNA聚合酶、dNTP混合液、MgCl₂溶液、荧光定量PCR反应缓冲液和去离子水。本发明克服了过去基因突变检测的诸多方法中各自存在的缺陷。本发明检测准确性高、检测简单方便、检测时间短、结果分析简单的优点，能够对PEAR1基因rs2768759号和rs12041331号两个多态性位点进行定性检测，根据SNP位点进行PCR荧光扩增反应，只需根据两种不同的荧光曲线是否起线就能进行结果判断，不会产生人为误差，提高效率降低检测成本，无需DNA提取，将细胞裂解后的悬液加入反应体系即可完成扩增。

主权项

一种检测人类PEAR1基因多态性的试剂盒，包括盒体和装于盒体内的物质，其特征在于：所述盒体内的物质包括检测PEAR1基因上的rs2768759号和rs12041331两个SNP位点的特异性引物及特异性荧光探针、Taq DNA聚合酶、dNTP混合液、MgCl₂溶液、荧光定量PCR反应缓冲液和去离子水；所述PEAR1基因上的rs2768759号位点特异性引物中的正义引物和反义引物的序列为：正义引物：5’‑CCACCCTCAGCCCTATCACT‑3’，反义引物：5’‑AGATTGAATCATGGGAGTGGG‑3’；所述PEAR1基因上的rs12041331号位点特异性荧光探针包括野生型探针和突变性探针，它们的序列为：野生型探针：5’‑FAM‑CACCTGTCCAGTTCC‑MGB‑3’突变型探针：5’‑HEX‑CACCTGTCCCGTTCC‑MGB‑3’；所述PEAR1基因上的rs12041331号位点特异性引物中的正义引物和反义引物的序列为：正义引物：5’‑GGTGAGGGGTTATCCTATGCTAC‑3’，反义引物：5’‑GATTAGAGTTCCTGGTGGACAAGA‑3’；所述PEAR1基因上的rs2768759号位点特异性荧光探针包括野生型探针和突变性探针，它们的序列为：野生型探针：5’‑FAM‑TCTCACTTCCATCACC‑MGB‑3’突变型探针：5’‑HEX‑TCTCACTTCCGTCACC‑MGB‑3’。