[发明专利]一种溶血性贫血患者外周血单核细胞的分离方法

摘要

本发明公开了一种溶血性贫血患者外周血单核细胞的分离方法，其包括：1)取外周血加入离心管中，离心去除富血小板血浆液层；2)加入浓度为3％的明胶生理盐水溶液，对沉淀细胞进行重悬；自然沉淀，收集明胶悬液层，并离心弃上液；3)往离心管中加入无血清培养基再次重悬细胞；4)将重悬细胞悬液加在淋巴细胞分离液的液面上，离心并将白雾状细胞层转移；5)对白雾状细胞层进行离心，除上清，再加入PBS溶液洗涤三次，加入无血清AIM-V培养基配置成悬液。本发明先采用低的离心力对外周血进行离心，保证去除的上层清液中含有尽可能多的血小板。同时，又通过加入明胶生理盐水溶液，对破碎的红细胞加速沉淀，大大降低红细胞残留。

主权项

一种溶血性贫血患者外周血单核细胞的分离方法，其特征在于：所述分离方法包括以下步骤：1)取溶血性贫血患者外周血加入离心管中，低速离心，溶液分为三层，将顶层的富血小板血浆液面层除去；2)往离心管中加入浓度为3％的明胶生理盐水溶液，对沉淀细胞进行重悬；3)将重悬的细胞溶液自然沉淀60‑70min，收集离心管中的明胶悬液层，并离心弃去上层清液；4)往离心管中加入无血清培养基再次重悬细胞；5)将重悬的细胞悬液加在淋巴细胞分离液的液面上，离心并将离心管中层白雾状细胞层转移到新的离心管中；6)对白雾状细胞层进行离心，除上清，再加入PBS溶液，重悬洗涤，重复两次，加入无血清AIM‑V培养基配置成悬液。