[发明专利]一种藻体中富里酸亚组分的分级提取方法

摘要

本发明公开了一种藻体中富里酸亚组分的分级提取方法，所述分级提取方法包括如下步骤：藻体预处理、藻体索氏提取、藻体氯化钙及酸洗、藻体碳酸钠处理、藻体碱液提取、分级富里酸亚组分粗品的浓缩。通过上述方式，本发明能够通过利用不同的溶液连续萃取技术从藻体中分级提取出富里酸亚组分溶液，富集和纯化后，最终得到分级的富里酸亚组分固体样品。

主权项

一种藻体中富里酸亚组分的分级提取方法，其特征在于，所述分级提取方法包括如下步骤：步骤a、藻体预处理：取风干后的藻体剔除杂物，在40‑50oC温度条件下烘干，碾磨过筛，得到藻体粉末；步骤b、藻体索氏提取：将藻体粉末置于索式提取器中，依次用乙醚、丙酮、95%乙醇、二氧杂环己烷和去离子水为提取液进行索氏提取，所得固体标记为索提藻体；步骤c、藻体氯化钙及酸洗：用氯化钙溶液连续三次提取索提藻体，每次提取时均保持固液比为1：10，在40‑60^oC条件下连续搅拌15‑40 min后，离心得到固体，标记为氯化钙处理藻体；用盐酸溶液连续三次提取氯化钙处理藻体，每次提取时均保持固液比为1：10，每次均连续搅拌10‑30 min后，离心得到的固体，标记为盐酸处理藻体；向盐酸处理藻体中加入去离子水，使固液比达到1：10，连续搅拌10 ‑30min后，离心得到固体，标记为水洗盐酸处理藻体；步骤d、藻体碳酸钠处理：用碳酸钠溶液连续三次提取水洗盐酸处理藻体，每次提取时均保持固液比为1：10，每次提取时均在30‑45^oC条件下连续搅拌30‑50 min；离心得到的固体，标记为碳酸钠处理藻体；向碳酸钠处理藻体中加入去离子水，使固液比达到1：10，连续搅拌10 ‑30 min后，离心得到固体，标记为水洗碳酸钠处理藻体；步骤e、藻体碱液提取：向水洗碳酸钠处理藻体中加入去离子水，使其固液比达到1:3，用盐酸和氢氧化钠调节溶液pH值=6.0～8.0，然后在氮气保护下，向溶液中加入焦磷酸钠溶液，使溶液中固液比为1:10且焦磷酸钠浓度为0.1 mol/L，然后将溶液连续搅拌4 ‑6h，静置20‑28 h后，离心分离，得到上层清液1及焦磷酸钠提取藻体1；在氮气保护下，向焦磷酸钠提取藻体1中加入焦磷酸钠溶液，使溶液中固液比为1:10且焦磷酸钠浓度为0.1 mol/L，然后将溶液连续搅拌4 ‑6h，静置20‑28 h后，离心分离，得到上层清液2及焦磷酸钠提取藻体2；在氮气保护下，向焦磷酸钠提取藻体2中加入焦磷酸钠溶液，使溶液中固液比为1:10且焦磷酸钠浓度为0.1 mol/L，然后将溶液连续搅拌4‑6 h，静置20‑28 h后，离心分离，得到上层清液3及焦磷酸钠提取藻体3；在氮气保护下，向焦磷酸钠提取藻体3中加入去离子水，使溶液中固液比达到1:5，用盐酸和氢氧化钠调节其pH值介于6.0～8.0之间，然后向溶液中加入氢氧化钠溶液，使溶液中固液比为1:10且氢氧化钠浓度为0.1 mol/L，然后将溶液连续搅拌4‑6 h，静置20‑28 h后，离心分离，得到上层清液4及氢氧化钠提取藻体1；在氮气保护下，向氢氧化钠提取藻体1中加入氢氧化钠溶液，使溶液中固液比为1:10且氢氧化钠浓度为0.1 mol/L，然后将溶液连续搅拌4‑6 h，静置20‑28 h后，离心分离，得到上层清液5及氢氧化钠提取藻体2；在氮气保护下，向氢氧化钠提取藻体2中加入氢氧化钠溶液，使溶液中固液比为1:10且氢氧化钠浓度为0.1 mol/L，然后将溶液连续搅拌4‑6 h，静置20‑28h后，离心分离，得到上层清液6及氢氧化钠提取藻体3；步骤f：分级富里酸亚组分粗品的浓缩：用盐酸将步骤e中的上层清液1‑6，共计6份上层清液分别调节至pH值等于1.0，然后分别加入氢氟酸，使每份酸化液中的氢氟酸浓度为0.3 mol/L时，再分别搅拌4‑6 h，分别静置20‑28 h，离心分离，得到六份上层清液，分别将其标记为无硅富里酸亚组分溶液1～无硅富里酸亚组分溶液6，共计6份无硅富里酸亚组分溶液；将上述6份无硅富里酸亚组分溶液分别以15倍柱体积/h流速通过XAD—8树脂柱进行吸附；吸附完成后，用去离子水以15倍柱体积/h的流速分别淋洗每份无硅富里酸亚组分所吸附的XAD—8树脂柱，弃去流出液，然后再依次用1倍柱体积的0.1 mol/L氢氧化钠溶液和2倍柱体积的去离子水以3倍柱体积/h的流速淋洗每份无硅富里酸亚组分所吸附的XAD—8树脂柱，得到的流出液再通过氢离子饱和的氢型阳离子交换树脂交换，最终流出液分别标记为富里酸亚组分1～富里酸亚组分6，共计六份富里酸亚组分溶液；将富里酸亚组分1～富里酸亚组分6溶液分别冷冻干燥，最终得到六份固体富里酸亚组分分级样品。