[发明专利]小鼠CRABP2基因真核表达载体的构建及应用在审
申请号: | 201510591834.9 | 申请日: | 2015-09-17 |
公开(公告)号: | CN105296519A | 公开(公告)日: | 2016-02-03 |
发明(设计)人: | 袁晶;陶恒勋 | 申请(专利权)人: | 长江大学 |
主分类号: | C12N15/66 | 分类号: | C12N15/66;C12N15/85;C12Q1/68 |
代理公司: | 武汉河山金堂专利事务所(普通合伙) 42212 | 代理人: | 胡清堂 |
地址: | 434023*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 一种小鼠CRABP2基因真核表达载体的构建,包括以下步骤:(1)、提取小鼠肌肉组织中的总RNA,合成cDNA第一链后,以合成的cDNA第一链为模板进行扩增,获得CRABP2基因;(2)、将步骤(1)中获得的产物克隆到pGEM-T easy载体,测序,将测序获得的阳性重组子命名为pGEM-T-CRABP2;(3)、将步骤(2)中的阳性重组子pGEM-T-CRABP2与真核表达载体pcDNA3.1(+)经双酶切后进行连接、转化,得到小鼠CRABP2真核表达载体。其优点是:利用一对引物进行PCR扩增,克隆得到小鼠CRABP2基因的完整编码区,并成功构建CRABP2基因的真核表达载体。 | ||
搜索关键词: | 小鼠 crabp2 基因 表达 载体 构建 应用 | ||
【主权项】:
小鼠CRABP2基因真核表达载体的构建,其特征在于:包括以下步骤:(1)、采用TRIzol法提取小鼠肌肉组织中的总RNA,合成cDNA第一链后,以合成的cDNA第一链为模板进行扩增,获得CRABP2基因;(2)、将步骤(1)中扩增后获得的产物克隆到pGEM‑T easy载体,挑选阳性重组子测序,获得基因序列SEQ ID NO:1,将测序获得的阳性重组子命名为pGEM‑T‑CRABP2;(3)、将步骤(2)中的阳性重组子pGEM‑T‑CRABP2与真核表达载体pcDNA3.1(+)连接、转化,得到小鼠CRABP2真核表达载体pcDNA3.1‑CRABP2的重组质粒。
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