[发明专利]一种酶制剂，制备方法及其在降解苏丹红上的应用

摘要

本发明公开了一种降解苏丹红I,II,III,IV的酶制剂及其制备方法。包括如下步骤：（1）将单色云芝菌株由斜面培养基转接入种子液中培养，然后转入装有基础液体培养基的三角瓶中，振荡培养，发酵液经过滤得到菌丝体，菌丝体用磷酸缓冲液洗涤多次，随后收集菌丝体，低温保藏备用；（2）菌丝体加入液氮后研磨成均一粉末，加入磷酸缓冲液，离心后取上清液；（3）将上述粗酶液采用40%硫酸铵沉淀，离心得沉淀即为酶制品。本发明的产品酶制剂为天然来源的产物，具有工艺简单、适合大规模工业化生产等特点，制备的酶制剂可以有效降解苏丹红I,II,III,IV染料，具有降解效率高，降解周期短，降解后的溶液成分简单等特点，具有良好的应用前景。

主权项

1.一种酶制剂，其特征在于，该酶制剂包含分子量为50‑85KD的蛋白酶；所述的酶制剂的制备方法，包括如下步骤：（1）将微生物菌种单色云芝Coriolus unicolor置于斜面培养基活化后置于无菌操作环境下，用接种针划取0.5 cm×0.5 cm的菌块接种于预先设有种子培养基的摇瓶中，置于转速为120 r/min的恒温振荡器中，在28℃下恒温培养4天，得到种子液；（2）将种子液转入含有发酵培养基的摇瓶中，在转速为120 r/min的恒温振荡器中，28℃下恒温培养7天；将培养好的发酵液离心10 min收集菌丝体；（3）用50 mM磷酸缓冲液清洗菌丝体后再在液氮下研磨至均一粉末，收集菌丝体粉末，加入50 mM磷酸缓冲液，置于10000 rpm冷冻离心机中4℃离心10 min后取上清液即为粗酶液；然后在上清液中加入硫酸铵至终浓度为40% wt，在4℃下放置24 h后置于10000 rpm冷冻离心机中4℃离心10 min，所得沉淀即为酶制剂。