[发明专利]一种采用HPLC法测定桑葚药材中柠檬酸含量的方法

摘要

本发明涉及一种采用HPLC方法测定桑葚药材中柠檬酸含量的方法，桑椹药材采用水作为溶剂加热回流提取，利用HPLC法，采用KromasilC18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；使用0.6％磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱；流速为0.5ml·min‑1；以209nm为检测波长；柱温为30℃，结果表明柠檬酸对照品在0.10320～1.72000mg·ml‑1质量浓度范围内线性关系良好(r＝0.9999)；精密度的RSD值为1.01％(n＝6)；测得平均加样回收率为98.29％，RSD值为0.93％(n＝6)，该方法简便、准确、易行，可用于桑椹药材的质量控制。

主权项

一种采用HPLC方法测定桑葚药材中柠檬酸含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制备对照品溶液称取柠檬酸对照品，加水制成浓度为1.70‑1.73mg·ml‑1的溶液，即得；(2)制备供试品溶液称取桑葚药材样品，配制成浓度为15‑25mg·ml‑1的水溶液，加热回流提取0.5‑1.5h；即得；(3)色谱条件所述的色谱条件为：色谱柱为Kromasil C18，其规格为250mm×4.6mm，5μm；流动相：0.6％的磷酸水溶液，检测器：紫外，检测波长：209nm，流速：0.5mL·min‑1，柱温：30℃，进样量10μl；(4)测试所述测试包括两步，第一步绘制标准曲线，包括如下步骤：将所述的对照品溶液稀释成浓度范围为0.1‑2.0mg·mL‑1的待测对照品溶液5‑7个，按照上述色谱条件，分别测定待测对照品溶液以及对照品溶液的峰面积，然后以峰面积为纵坐标，柠檬酸的质量浓度为横坐标进行线性回归，得到回归方程；第二步测定供试品溶液，按照上述色谱条件，测定供试品溶液的峰面积，根据回归方程，得到供试品溶液的柠檬酸含量。