[发明专利]一种快速提取和分离牡丹种子中脂类成分的方法

摘要

一种快速提取和分离牡丹种子中脂类成分的方法，通过提取牡丹种子中的总脂，将总脂上样至固相萃取硅胶小柱，再分别以氯仿、丙酮和甲醇作洗脱液进行洗脱，获得中性脂、糖脂和磷脂，再对中性脂、糖脂和磷脂分别做进一步展开，从中性脂中分离出三酰甘油，从糖脂中分离出单半乳糖二脂酰甘油、双半乳糖二脂酰甘油和硫代异鼠李糖二脂酰甘油，从磷脂中分离出磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、磷脂酸、磷酯酰丝氨酸、磷脂酰甘油。本发明能够对牡丹种子油脂中的9种脂类成分进行有效的分离，获得的脂类成分种类丰富，总脂、中性脂、糖脂和磷脂经甲酯化后获得脂肪酸，该方法快速、简单且成本低，为基础研究提供切实可行的分析方法。

主权项

1.一种快速提取和分离牡丹种子中脂类成分的方法，其包括以下步骤：/n1)提取总脂/n取牡丹种子，于30～60℃烘干、去壳、液氮研磨成粉末，将粉末用氯仿和甲醇的混合液于30～40℃抽提0.5～2h，得到抽提液，再加入氯仿和水，振荡混匀，静置或离心后，分层，分离出有机相；将提取后的剩余残渣重复上述步骤1～2次，合并各次分离出的有机相，用氮气吹干，得到牡丹种子总脂；/n2)分离总脂中的中性脂、糖脂和磷脂/n用氯仿平衡硅胶柱，将得到的牡丹种子总脂上样至硅胶柱中，先用氯仿洗脱，得到氯仿洗脱液；再用丙酮洗脱，得到丙酮洗脱液；最后用甲醇洗脱，得到甲醇洗脱液；/n将氯仿洗脱液、丙酮洗脱液、甲醇洗脱液浓缩干燥后分别得到中性脂、糖脂、磷脂；/n3)展开并分离中性脂、糖脂和磷脂中的不同成分/n将步骤2)得到的中性脂、糖脂和磷脂溶解后，分别点样于硅胶板上，将硅胶板置于染缸中进行展开；/n用展示剂一对糖脂和磷脂进行展开、显色、分离；其中，分离糖脂后得到单半乳糖二脂酰甘油、双半乳糖二脂酰甘油和硫代异鼠李糖二脂酰甘油；分离磷脂后得到磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、磷脂酸、磷酯酰丝氨酸、磷脂酰甘油；所述展示剂一为乙酸乙酯、异丙醇、氯仿、甲醇和0.2％～0.3％KCl水溶液的混合液，其中乙酸乙酯：异丙醇：氯仿：甲醇：0.2％～0.3％KCl水溶液的体积比为25：25：25：10：7.2～10.8；/n用展示剂二对中性脂进行展开、显色、分离，得到三酰甘油；所述展示剂二为正己烷、乙醚和冰乙酸的混合液，其中正己烷：乙醚：冰乙酸的体积比为40：10：0.5～1.5。/n