[发明专利]一种蛋白质分离纯化的方法在审
| 申请号： | 201510651770.7 | 申请日： | 2015-09-30 |
| 公开（公告）号： | CN105131080A | 公开（公告）日： | 2015-12-09 |
| 发明（设计）人： | 冀玉良;高宝云;李堆淑;李丹青;张军 | 申请（专利权）人： | 商洛学院 |
| 主分类号： | C07K1/36 | 分类号： | C07K1/36;C07K1/34;C07K1/26;C07K1/20;C07K1/14 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 726000 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种蛋白质分离纯化的方法，包括如下步骤：向待分离溶液中添加缓冲溶液和亲水性有机溶剂，搅拌均匀，收集上相萃取液；将收集的上相萃取液经蒸馏回收溶剂后过疏水层析柱，先用平衡液洗脱至无蛋白流出，再用洗脱液梯度洗脱，收集蛋白馏分；将收集的蛋白馏分加入CuSO4溶液，使Cu2+与组蛋白结合，加样至上样口，施加电压开始电泳，电泳结束后，将所得的凝胶胶条切下后横放于分离胶上，加入指示剂，进行电泳分离，电泳结束后，取出凝胶依次通过蛋白质洗脱板和分子半透膜分离，回收蛋白质。本发明能够有效地分离复杂的蛋白质混合物为单一的蛋白质；提高了蛋白质的分离和纯化效率并且保持了蛋白质的功能或酶活性，操作简便。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 蛋白质 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种蛋白质分离纯化的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、向待分离溶液中添加缓冲溶液和亲水性有机溶剂，搅拌均匀，形成双水相萃取体系，静置后，收集上相萃取液；S2、将步骤S1收集的上相萃取液经蒸馏回收溶剂后过疏水层析柱，先用平衡液洗脱至无蛋白流出，再用洗脱液梯度洗脱，收集蛋白馏分；S3、将S2收集的蛋白馏分加入CuSO4溶液，使Cu2+与蛋白充分结合，得到蛋白生物样品上样液；S4、将步骤S2得到的蛋白生物样品上样液加样至上样口，施加电压开始电泳，电泳结束后，得到凝胶胶条；S5、将所得的凝胶胶条切下后横放于分离胶上，加入指示剂，进行电泳分离，电泳结束后，取出凝胶依次通过蛋白质洗脱板和分子半透膜分离，回收蛋白质。
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