[发明专利]桃砧木中桃抗砧1号的组培繁殖技术

摘要

本发明公开了桃砧木中桃抗砧1号的组培繁殖技术，它包括外植体的采集与预处理、无菌苗的建立、增殖培养、伸长培养、生根培养和温室炼苗移栽等工序，采用两种增殖培养基交替培养，在增殖效率与玻璃化之间找到了平衡点，也为其它桃材料的组培快繁提供了技术参考。该技术针对性强，外植体初代诱导萌芽率达80%以上，增殖培养增殖系数可达2-5，伸长培养壮苗后生根率可达80%以上，炼苗移栽成活率90%左右。本发明可在组培条件下不断生产出中桃抗砧1号的无性系苗木，用于老桃区桃树再植障碍问题的解决。

主权项

桃砧木中桃抗砧1号的组培繁殖技术，其特征在于：它包括以下步骤：1）外植体的采集与预处理在桃枝条旺盛生长期，挑选生长旺盛、健康无病虫害10cm长左右的新梢，去除叶子和顶芽，留下0.2‑0.3cm长的叶柄，然后用含有洗洁精的自来水清洗枝条表面的灰尘后，将其剪成含有2个嫩芽的小段；在二溴海因溶液中浸泡20min，然后用流水冲洗1‑2h，用于初代培养；2）无菌苗的建立在超净工作台上，将20个左右的茎段放入500mL的烧杯中，首先加入75%乙醇淹没实验材料，缓慢摇晃30s，迅速将乙醇倒出；然后加入0.1%升汞溶液搅拌4min，最后用无菌水冲洗3次，浸泡1次，浸泡时间为5‑10min；将材料放在盛有无菌滤纸的培养皿中，吸干材料表面水分，用无菌手术刀分别切去茎段的基部和顶部0.2cm，然后每个茎段接种在含有初代培养基的试管中进行接种培养；3）增殖培养组培材料在增殖培养基Ⅰ上增殖2代，再在增殖培养基Ⅱ上增殖1代，随后再转入增殖培养基Ⅰ，如此循环往复，直到得到所需数量的无根苗；4）伸长培养用手术刀片将经过增殖培养的丛生芽基部切一个新切口，转入伸长培养基培养，当这些丛生芽继续生长到长度为1.5cm左右时，从主干枝条上切下，接种在伸长培养基中继续培养3周左右；5）生根阶段将经过伸长培养的无根组培苗基部切一个新切口，剪去基部侧芽和叶片，接种到盛有生根诱导培养基的培养瓶中，每个培养瓶中放置3‑4个待生根苗；先将培养瓶放在组培间内黑暗条件下培养5‑7天，再放到组培室的散射光下培养2天，最后回归到正常组培苗培育的光、温条件培养2‑3周，待根长出后用于炼苗移栽；6）温室炼苗移栽待组培苗生根2‑4条，根长1‑4cm时，进行组培苗炼苗5‑7天，在下午16:00‑18:00移栽到装有珍珠岩与腐植土1:1混配的湿润基质的育苗盒中，浇透水，盖上透明保湿罩，上留1个风口，置于湿度60‑70%的温室内让其生长成苗；移栽后不定期进行喷水和喷洒杀菌剂杀菌等。