[发明专利]一种快速发现天然产物中低含量活性成分的新方法

摘要

本发明涉及天然药物领域，具体涉及一种快速发现天然产物中低含量活性成分的方法。该方法通过相对定量将天然药物的全成分划分为高含量成分和低含量成分，采用高分辨色谱峰馏分制备方法直接建立高含量馏分库，并获得相应质谱信息。在敲除这些高含量成分之后对低含量成分进行富集，溶剂浓缩并二次分离之后获得低含量馏分库，同时获得低含量成分质谱信息。在此基础上，分别对高、低含量馏分进行活性筛选。该方法具有快速、精确、自动化程度高、操作简便、成本较低、适用性强等优点，适用于天然产物中低含量活性成分的发现。

主权项

一种快速发现天然产物中低含量活性成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)以一种天然来源的植物、动物、微生物、海洋生物或中药复方为对象，制备相应的提取物；(2)采用常规液相色谱系统与自动组分收集系统联用，建立上述分析对象的全成分色谱指纹图谱条件；(3)高低含量的划分：采用面积归一化法，将各活性化合物在样品制备色谱图中显示的峰面积，分别与各活性化合物在样品制备色谱图中显示的峰面积的总和相比，得到各活性成分的相对含量。并将各活性成分的相对含量按照从低到高的顺序排序，选择合适的标准将全成分划分为高含量成分和低含量成分；(4)高含量馏分库的建立：运行步骤(2)中的色谱指纹图谱条件，通过软件设置各指纹峰的起始时间和结束时间以及收集位置，使组分收集系统的程序根据上述设置，自动、精确地收集各指纹峰；单次进样直接收集高含量成分获得高含量馏分库；低含量馏分库的建立：敲除高含量成分之后对低含量成分进行富集，样品经回收溶剂后再次进样，自动、精确收集指纹图谱中的每一个色谱峰，即馏分；(5)采用串联质谱检测器同步获取高、低含量馏分库的质谱信息进行化合物鉴定；(6)对每个馏分进行脱溶剂处理，以备后续筛选。