[发明专利]一种富硒益生菌中硒形态测定的方法在审
| 申请号： | 201510657117.1 | 申请日： | 2015-10-12 |
| 公开（公告）号： | CN105181850A | 公开（公告）日： | 2015-12-23 |
| 发明（设计）人： | 侯遇珠;袁林喜;尹雪斌 | 申请（专利权）人： | 中国科学技术大学苏州研究院 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06 |
| 代理公司： | 北京汇泽知识产权代理有限公司 11228 | 代理人： | 张秋越 |
| 地址： | 215123 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种富硒益生菌中硒形态测定的方法，其通过对富硒益生菌样品利用溶菌酶进行破壁处理，然后利用处理过的样品，采用分步连续提取的方式进行酶解，然后将各步酶促反应得到的酶解液过膜后利用HPLC-HG-AFS上机测定硒形态。采用本法对富硒益生菌样品测定硒形态，其提取率可高达50～80%，且样品本身的硒形态稳定，反应过程中不会出现硒形态的变化。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 富硒益生菌中硒 形态 测定 方法 | ||
【主权项】：
一种富硒益生菌中硒形态测定的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）样品的前处理：取经过研磨的富硒益生菌干样，加入缓冲液中，进行超声提取；（2）样品破壁酶解：取步骤（1）经过前处理的样品，调节pH值至5‑7，然后向其中加入溶菌酶，进行酶解；（3）样品酶解：将步骤（2）破壁酶解后的样品的pH值调节至1.5‑2.5，然后加入胃蛋白酶，进行酶解；（4）样品分离后再酶解：将步骤（3）酶解后的样品进行离心分离，取离心后的上清液过0.22μm水系膜待测；将离心后的沉淀部分继续加入缓冲液，调节pH值至7.0‑8.0，加入胰蛋白酶，然后进行酶解；（5）样品分离：将步骤（4）经胰蛋白酶酶解后的样品进行离心分离，取离心后的上清液过0.22μm水系膜待测；（6）上机测定：对步骤（4）和（5）中过水系膜后的酶解液采用高效液相色谱法与氢化物发生‑原子荧光光谱法联用上机测定样品中的硒形态。
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