[发明专利]含反义碱基的探针法实时荧光PCR在审
| 申请号： | 201510684747.8 | 申请日： | 2015-10-22 |
| 公开（公告）号： | CN106609296A | 公开（公告）日： | 2017-05-03 |
| 发明（设计）人： | 岳素文;何玉贵;江洪 | 申请（专利权）人： | 北京泰格瑞分子检验有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 102209 北京市昌*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 含反义碱基的探针法实时荧光PCR，其特征是所选的TaqMan及MGB探针的中部序列引入1～2个或以上的反义修饰的2’-O-Methyl碱基，2’-F-RNA碱基；其关键是荧光TaqMan/MGB探针5’端荧光基团标记的正常碱基序列仍能被Taq酶的外切酶活性水解产生荧光，探针因中部的反义碱基而失去了作为PCR扩增模板作用，引物-探针聚合因不能延伸而不能扩增，结合中部同序引物，单独矿物油密闭，消除指数非特异性反应。 | ||
| 搜索关键词： | 反义 碱基 探针 实时 荧光 pcr | ||
【主权项】：
含反义碱基的探针法实时荧光PCR，其特征在于，所选的TaqMan及MGB探针离5’端5至20个碱基的中部序列中引入1至5个反义2’‑O‑Methyl碱基或2’‑F‑RNA碱基；其关键特征在于中部含反义碱基的寡核苷酸荧光TaqMan/MGB探针保留其5’端荧光基团标记的正常碱基序列仍旧能被Taq聚合酶5’外切酶活性所识别、水解；但探针失去了作为PCR扩增模板作用，引物非特异结合探针序列后Taq聚合酶不能识别反义碱基的模板而不能延伸、扩增，从而减少了内源性的引物‑探针的聚合非特异性扩增。
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