[发明专利]一种测定生菜保卫细胞蔗糖转化酶活力的方法有效
| 申请号： | 201510718219.X | 申请日： | 2015-10-29 |
| 公开（公告）号： | CN105238849B | 公开（公告）日： | 2018-07-06 |
| 发明（设计）人： | 倪迪安;陈素芬;梁可;孙佳欣;李建 | 申请（专利权）人： | 上海应用技术学院 |
| 主分类号： | C12Q1/54 | 分类号： | C12Q1/54;C12Q1/48;C12Q1/34;C12Q1/32 |
| 代理公司： | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人： | 吴宝根 |
| 地址： | 200235 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种测定生菜保卫细胞蔗糖转化酶活力的方法，包括一个制备生菜保卫细胞原生质体的步骤；所述的生菜保卫细胞的分离是通过酶解离法进行的；一个提取生菜保卫细胞原生质体蛋白质的步骤；将获得的得到的生菜保卫细胞原生质体通过丙酮沉淀法提取；一个对测定生菜保卫细胞原生质体蛋白质的步骤，所述的测定是通过考马斯亮蓝G‑250法测定的；一个测定蔗糖转化酶活力的步骤；得到的保卫细胞通过酶联的方法测定酶化学反应的产物即葡萄糖含量，根据所产生的葡萄糖量、反应时间，保卫细胞的蛋白质含量计算蔗糖转化酶的活性。本发明解决了现有技术中测定生菜保卫细胞蔗糖转化酶活力困难的技术问题。 | ||
| 搜索关键词： | 生菜 蔗糖转化酶 细胞原生质体 细胞 蛋白质 丙酮沉淀法 考马斯亮蓝 化学反应 葡萄糖 含量计算 葡萄糖量 细胞通过 酶解 酶联 制备 | ||
【主权项】：
1.一种测定生菜保卫细胞蔗糖转化酶活力的方法，其特征在于包括如下步骤：1)一个制备生菜保卫细胞原生质体的步骤；所述的生菜保卫细胞的分离是通过酶解分离法进行的；2)一个提取生菜保卫细胞原生质体蛋白质的步骤；将步骤1)获得的得到的生菜保卫细胞原生质体通过丙酮沉淀法提取；3)一个测定生菜保卫细胞原生质体蛋白质的步骤，所述的测定是通过考马斯亮蓝G‑250法测定的；4)一个测定蔗糖转化酶活力的步骤；得到的保卫细胞通过酶联的方法测定酶化学反应的产物即葡萄糖含量，根据所产生的葡萄糖量、反应时间、保卫细胞的蛋白质含量计算蔗糖转化酶的活性，酶活力＝葡萄糖的质量/(反应时间×保卫细胞总蛋白量)，其中葡萄糖的质量单位为毫克，反应时间的单位为小时，保卫细胞总蛋白量的单位为微克。
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