[发明专利]一种石斛药材的检测方法

摘要

本发明涉及一种石斛药材的检测方法，步骤包括以夏佛托苷色谱峰为对照品，用HPLC(高效液相色谱法)制定标准指纹图谱；通过供试样品的指纹图谱与标准指纹图谱的对比，确定供试样品的质量。该方法对各供试样品的前处理方法简单，特征性成分保留完成，且供试样品溶液稳定性良好；该高效液相色谱方法的精密度较高、重现性良好，分析时间较短，具有一定的专属性，所得指纹图谱中各指纹峰分离效果较好，能够准确全面的反应石斛药材质量，进一步完善了石斛药材的质量标准，从而可以应用于药用石斛的石斛组培苗、石斛鲜品、石斛干品的质量分级及真伪鉴别。

主权项

一种石斛药材的检测方法，其特征在于，以夏佛托苷为对照品，采用高效液相色谱法制定标准指纹图谱，测定供试石斛样品的指纹图谱与标准指纹图谱比较，计算相似度，对样品进行评价，具体检测步骤如下：①对照品溶液的制备：精密称取夏佛托苷，甲醇稀释溶解；②标准样品溶液的制备：分别取某类不同批次的标准石斛药材干燥样品，粉碎，过筛，精密称取粉末，加入水或一元醇溶解，室温下超声，过滤，滤液浓缩至干，再用甲醇溶解，容量瓶中定容，摇匀，微孔滤膜过滤，即得该类各个批次的标准石斛样品溶液；③石斛药材HPLC指纹图谱的建立：Alltima C18色谱柱；二极管阵列检测器；流动相为乙腈/乙酸‑乙酸铵溶液，梯度洗脱；检测波长为280±10nm；柱温25‑35℃；流速0.8‑1.2ml/min；在此条件下分析该类各个批次的标准石斛样品溶液，得到该类各个批次标准石斛样品的指纹图谱；④标准指纹图谱的建立：以对照样品夏佛托苷色谱峰作为指纹图谱的参照峰，计算该类各个批次标准石斛样品各特征峰的相对保留时间和保留峰面积，制定得到该类石斛药材的标准指纹图谱；⑤供试样品溶液的制备：取供试石斛药材干燥样品，粉碎，过筛，精密称取石斛粉末，加入水或一元醇溶解，室温下超声，过滤，滤液浓缩至干，再用甲醇溶解，容量瓶中定容，摇匀，微孔滤膜过滤，即得供试样品溶液；⑥石斛药材检测：按照步骤③测定供试样品的指纹图谱，以供试样品指纹图谱中的特征峰的相对保留时间和保留峰面积与标准指纹图谱对比；其中，流动相A为乙酸‑乙酸铵溶液，流动相B为乙腈；所述洗脱梯度如下所示：理论板数按夏佛托苷计算，应不低于10000；所述石斛的标准指纹图谱中含有11个特征峰，保留时间分别为：10.83±0.3min、13.01±0.3min、21.22±0.3min、24.15±0.3min、27.84±0.3min、28.80±0.3min、43.32±0.3min、44.64±0.3min、52.67±0.3min、56.37±0.3min以及66.15±0.3min，其中，保留时间为24.15±0.3min的峰为夏佛托苷对照品的特征峰。