[发明专利]一种丹红注射液的指纹图谱测定方法

摘要

本发明涉及丹红注射液的质量控制方法，具体涉及一种丹红注射液的指纹图谱测定方法，属于药物分析技术领域，该测定方法是通过以下步骤实现的（1）对照品溶液的制备；（2）内标溶液的制备；（3）供试品溶液的制备；（4）利用高效液相色谱‑质谱法进行分析测定；本发明创新性的在复杂的指纹图谱图中定量外加入一个内标峰，使建立的方法准确简便、灵敏度高、重复性好。本发明能够更全面地监控原料药材、半成品和成品质量，监控生产工艺的稳定性。

主权项

一种丹红注射液的指纹图谱测定方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）对照品溶液的制备：分别称取异绿原酸C、迷迭香酸、紫丁香苷、腺苷、5‑羟甲基糠醛、香豆酸、山柰酚‑3‑O‑芸香糖苷、西红花苷I、原儿茶酸、原儿茶醛、丹参素钠、咖啡酸对照品，分别加乙腈溶解，分别制成0.1mg/ml的对照品溶液；（2）内标溶液的制备：称取异绿原酸C，加入乙腈制成浓度为1mg/mL的内标溶液；（3）供试品溶液制备：量取丹红注射液，加入0.4%甲酸水溶液稀释，摇匀，取稀释液加入浓度为1mg/ml的内标溶液，混匀，即得；（4）利用高效液相色谱‑质谱法进行分析测定；所述高效液相色谱分离使用Agela Venusil MP C18色谱柱：250 mm×4.6 mm，3 μm，在柱温30 ℃，流速1.0 mL/min；检测波长280 nm；进样量10 μL条件下，以乙腈为流动相A，体积分数为0.2%的甲酸水溶液为流动相B，体积分数为0.5%的甲酸水溶液为流动相C进行梯度洗脱；所述梯度洗脱的条件为：0～4 min，0～0.3%流动相A，100～99.7%流动相B；4～6 min，0.3～1.2%流动相A，99.7～98.8%流动相B；6～15 min，1.2～3%流动相A，98.8～97%流动相B；15～30 min，3～3%流动相A，97～97%流动相B；30～40 min，3～5%流动相A，97～95%流动相B；40～60min，5～5%流动相A，95～95%流动相B；60～70 min，5～8%流动相A，95～92%流动相B；70～100 min，8～8%流动相A，92～92%流动相B；100～125 min，8～14%流动相A，92～86%流动相B；125～165 min，14～15.6%流动相A，86～0%流动相B，0～84.4%流动相C；165～260 min，15.6～15.6%流动相A，84.4～84.4%流动相C；260～272 min，15.6～16.7%流动相A，84.4～83.3%流动相C；272～320 min，16.7～16.7%流动相A，83.3～83.3%流动相C；320～380 min，16.7～25%流动相A，83.3～75%流动相C；380～400 min， 25～25%流动相A，75～75%流动相C；上述百分比均为体积百分比。