[发明专利]一种定量分析壳聚糖的荧光猝灭法有效

专利信息
申请号: 201510774801.8 申请日: 2015-11-13
公开(公告)号: CN105300945B 公开(公告)日: 2018-08-24
发明(设计)人: 白研;苏政权;张伟爱;马彩娟;李建强 申请(专利权)人: 广东药科大学
主分类号: G01N21/64 分类号: G01N21/64
代理公司: 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 代理人: 陈卫
地址: 510006 广东*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明属于检测技术领域,具体公开了一种定量分析壳聚糖的荧光猝灭法。本发明首先研究了弱酸环境下活性红4与壳聚糖缔合后的光谱特征,及其在壳聚糖定量分析中的应用。结果表明在弱酸性B‑R缓冲体系中,壳聚糖对活性红4存在荧光猝灭作用,在λex/λem=285nm/341nm波长处,0.050~2.00µg/mL的浓度范围内,其荧光猝灭程度与壳聚糖浓度呈良好的线性关系。线性方程为:ΔF=68.78c+2.648(c,μg/mL),R2=0.9992,检出限为0.039μg/mL。据此,建立了以活性红4为探针定量分析壳聚糖的荧光猝灭法,该方法的回收率为96.27~105.3%。
搜索关键词: 一种 定量分析 聚糖 荧光 猝灭法
【主权项】:
1.一种定量分析壳聚糖的荧光猝灭法,其特征在于,包括以下步骤:标准曲线的绘制:配置n个成梯度浓度的壳聚糖溶液和1个空白试剂,向n个成梯度浓度的壳聚糖溶液和1个空白试剂中分别加入2倍体积的B‑R缓冲溶液,然后再分别在壳聚糖溶液和空白溶液中加入相同体积的活性红4 溶液,混合均匀后得到稀释后的成浓度梯度的壳聚糖待测溶液,静置后分别检测壳聚糖待测溶液的荧光强度,绘制标准曲线,进一步得线性方程:ΔF =68.78c+2.648(c,μg/mL)式中ΔF = F0‑F,F0为空白溶液的荧光强度,F为不同浓度的壳聚糖溶液的荧光强度;样品检测:向用醋酸处理待测样品后的上清液中,加入2倍体积的B‑R缓冲溶液,然后再加入等体积的活性红4溶液,混合均匀后静置,检测荧光强度,由线性方程计算出待测样品中壳聚糖的浓度。
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