[发明专利]铁皮石斛种子的小苗计数法

摘要

本发明公开了一种铁皮石斛种子的小苗计数法，将铁皮石斛的种子萌发生长成小苗，通过计算小苗的数量得到种子的数量。由于该法系将细微、难以采用常规的、直接肉眼分辨计数的铁皮石斛蒴果中的种子播在培养基表面，利用配制培养基丰富的营养成份，为铁皮石斛种子萌发及生长提供养料和水分，确保其蒴果保存的种子在培养基上基本可以成活，并让种子萌发生长成肉眼能清楚分辨和计数的一定大小的小苗，使之能直观、简便计数，则通过计数小苗数量即可得到种子的数量。本发明使用简便、实用性强、不需要借助其他较精密的显微仪器设备，就可以准确计数铁皮石斛蒴果中的种子数量，从而方便得出生产种苗的数量，这为大规模育苗和生产提供准确的指导和参考。

主权项

1.一种铁皮石斛种子的小苗计数法，其特征在于将铁皮石斛蒴果中的种子播在培养基表面使其萌发生长成小苗，通过计算小苗的数量得到种子的数量；所述培养基组成为MS+1.5 mg/L 6‑BA+0.5mg/LＮAA+200g/L马铃薯浸出液+20g /L蔗糖+5g /L琼脂，pH5.8；该法具体包括以下步骤：<1>培养基制备按配方制备培养基，并用直径6cm、高10cm的平底玻璃瓶分装，每瓶装25ml，然后置121℃、1.1kg/㎝2的压力下灭菌20min，待用；<2>种子处理铁皮石斛蒴果依次用洗洁精水溶液浸泡5min、自来水冲洗15‑30min，然后在超净工作台上放入1g/LHgCl2溶液中灭菌15min，无菌水冲洗5次后，无菌滤纸吸干果实表面水分，待用；<3>种子播种将蒴果中的种子接入培养基表面；<4>种子培养将接好的培养基放25℃培养室内，在辅助光照10‑12小时/天、光照强度1500lux条件下培养；<5>种子计数待种子长成小苗，平均株高达5.0 mm，取出全部小苗计数，得到蒴果中种子的数量。