[发明专利]一种制备胰凝乳蛋白酶的方法在审
申请号: | 201510826531.0 | 申请日: | 2015-11-25 |
公开(公告)号: | CN105368810A | 公开(公告)日: | 2016-03-02 |
发明(设计)人: | 刘乃山;赵叶华;刘翠珍 | 申请(专利权)人: | 青岛康原药业有限公司 |
主分类号: | C12N9/76 | 分类号: | C12N9/76 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266300 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种制备胰凝乳蛋白酶的方法。本发明的技术方案是将动物胰脏经过绞碎,灵活运用胰酶水解、丙酮沉淀、磷酸缓冲液盐溶、硫酸铵盐析等现代蛋白纯化技术,制备胰凝乳蛋白酶。本发明操作简单、成本低,非常适用于规模化大生产。 | ||
搜索关键词: | 一种 制备 凝乳 蛋白酶 方法 | ||
【主权项】:
一种制备胰凝乳蛋白酶的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:(1) 水解:将新鲜或冷冻动物胰脏绞碎置于容器中,加入丙酮搅拌脱水,离心得沉淀物,加入水及胰酶搅拌溶解,用氢氧化钠溶液调至pH值,保温搅拌,再加入硅藻土充分搅拌,过滤;(2)沉淀:收集滤液,加入丙酮搅匀,静置,虹吸弃去上层丙酮清液,然后用丙酮洗涤沉淀物,过滤甩干,干燥;得胰凝乳蛋白酶粗品;(3)提纯:将粗品用磷酸缓冲液溶解,搅拌混合,静置,然后加入硅藻土拌匀,过滤;往滤液中加入硫酸铵,过滤后可得盐析物;将盐析物再溶于碳酸缓冲液,然后在搅拌下逐滴加入饱和硫酸铵溶液,静置,过滤;(4)滤取晶体并用水冲洗,冷冻干燥,即可得胰凝乳蛋白酶。
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