[发明专利]一种基于CoFe2O4纳米粒子的NMR食源性致病菌快速检测方法

摘要

一种基于CoFe₂O₄纳米粒子的NMR食源性致病菌快速检测方法，属于食品安全致病菌快速检测技术领域。本发明依赖于建立的可以用于食品样本中致病菌的核磁共振检测方法，利用CoFe₂O₄纳米粒子的顺磁特性对核磁共振弛豫时间的影响，检测出样本中是否含有目标菌。不同的具体的对应关系为：纳米CoFe₂O₄纳米粒子，在一定条件下显示出线性关系，即CoFe₂O₄纳米粒子含量大，样品的自旋-晶格弛豫时间值越小，在一定范围能够定量检测目标菌。该方法可以用于食品样本中有害致病菌的快速检测，从而可以作为大批待检样品的快速筛选。

主权项

一种基于CoFe₂O₄纳米粒子的NMR食源性致病菌快速检测方法，其特征是步骤如下：（1）检测目标菌的CoFe₂O₄纳米粒子的制备；（2）将目标菌特异性单抗在酶标板上的固定备用，并将多余的活性位点用牛血清蛋白封闭；（3）将待检样品加到第（2）步所制得的酶标板上，孵育一段时间，若待检样品中含有目标菌，则会与酶标板上的单抗结合，用无菌的去离子水清洗后，目标菌被固定在酶标板上；（4）将第（1）步制得的CoFe₂O₄纳米粒子悬浊液加到第（3）步固定了目标菌的酶标板上，若存在目标菌则形成双抗夹心，用无菌的去离子水清洗，则没有结合的粒子就被洗掉，若不存在目标菌，则所有粒子都被洗掉；（5）用洗脱剂将酶标板上的双抗夹心的粒子洗下来，如果还存在粒子就是抓到目标菌的粒子；（6）第（5）步所得的粒子的悬浊液，进行核磁共振的弛豫时间测定；以无菌的去离子水重复上述步骤作为空白，测得的悬浊液的弛豫时间自旋‑晶格弛豫时间和自旋‑自旋弛豫时间相比无菌的去离子水有显著降低，则说明含有粒子，从而间接证明样本中有目标菌；粒子的量与自旋‑晶格弛豫时间和自旋‑自旋弛豫时间的下降呈正比，通过加标定量粒子而间接定量出目标菌的量。