[发明专利]一种检测转基因CaMV35S启动子的电极的制备方法及用途

摘要

本发明提供了一种检测转基因CaMV35S启动子电极的制备方法级用途，包括：还原氧化石墨烯/金纳米复合材料RGO/Au的制备步骤；硅@碲化镉纳米复合材料Si@CdTe的制备步骤；在ITO电极上制备探针1(Probe1)的步骤；向探针1(Probe1)修饰目标DNA(t-DNA)CaMV35S启动子的步骤；向目标DNA(t-DNA)CaMV35S启动子修饰探针2(Probe2)的步骤。本发明通过rGO/Au NPs和Si@CdTe两端双重信号放大，实现了对转基因CaMV35S启动子的灵敏检测，在0.05～100pM的浓度区间内，CaMV35S浓度与光电流呈现良好的线性关系，检出限可达0.017pM。

主权项

一种检测转基因CaMV35S启动子电极的制备方法，其特征在于，包括：步骤1、还原氧化石墨烯/金纳米复合材料RGO/Au的制备步骤；步骤2、二氧化硅纳米微球@碲化镉纳米复合材料SiO₂@CdTe的制备步骤；步骤3、在ITO电极上制备探针1的步骤：将RGO/Au分散于蒸馏水中得到RGO/Au分散液后滴涂于ITO电极表面的修饰区，进行干燥；取溶有探针1的tris‑HCl缓冲液滴涂于所述干燥后的RGO/Au表面，进行干燥；冲洗电极表面后，进行干燥，得到ITO‑rGO/Au‑Probe1；步骤4、向探针1修饰目标DNA CaMV35S启动子的步骤：取溶有目标DNA CaMV35S启动子的tris‑HCl缓冲液滴涂于所述ITO‑rGO/Au‑Probe1的表面，室温孵育，待干燥后冲洗电极，得到ITO‑rGO/Au‑Probe1‑t‑DNA；步骤5、向目标DNA CaMV35S启动子修饰探针2的步骤：将SiO₂@CdTe的蒸馏水分散液和N‑羟基琥珀酰亚胺的水溶液加入到乙基‑(3‑二甲基氨丙基)碳二亚胺盐酸盐的水溶液中进行反应，反应结束后，离心并洗涤得到固体A，将所得固体A加入到溶有探针2的tris‑HCl缓冲液中，得到混合液A，振荡反应一段时间后，得到固体产物Probe2/SiO₂@CdTe；将Probe2/SiO₂@CdTe分散于蒸馏水中后，得到混合液B，将混合液B滴涂于所述ITO‑rGO/Au‑Probe1‑t‑DNA表面，孵育，待干燥后冲洗电极表面，得到ITO‑rGO/Au‑Probe1‑t‑DNA‑Probe2/SiO₂@CdTe。