[发明专利]一种利用荧光探针在极端pH值下的活性细胞成像方法有效
| 申请号： | 201510880751.1 | 申请日： | 2015-12-04 |
| 公开（公告）号： | CN105548097B | 公开（公告）日： | 2018-06-29 |
| 发明（设计）人： | 曾晞;朱勤;牟兰;吴玉田;曾莉;张红 | 申请（专利权）人： | 贵州大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;C07D215/26;C09K11/06 |
| 代理公司： | 贵阳东圣专利商标事务有限公司 52002 | 代理人： | 徐逸心;袁庆云 |
| 地址： | 550025 贵州省*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： |
本发明是一种利用荧光探针在极端pH值下的活性细胞成像方法，属分析化学领域。以喹哪啶衍生物(E)‑2‑(2,4‑二羟基苯基)乙烯基‑8‑羟基喹啉，简称探针，为活性细胞中检测pH的荧光成像探针。先用乙腈和缓冲溶液分别配制pH为2~4、10~12的探针溶液，再将探针与活性细胞孵化后，用荧光倒置显微镜检测，分别呈现绿色荧光、红色荧光的细胞图像，随pH值的变化，细胞的荧光颜色和强度都发生变化；而探针在pH为5~9范围，则观察不到细胞的荧光图像。探针的化学结构式为： |
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| 搜索关键词： | 探针 活性细胞 荧光探针 极端pH 成像 荧光倒置显微镜 分析化学领域 细胞 二羟基苯基 化学结构式 红色荧光 缓冲溶液 绿色荧光 探针溶液 细胞图像 荧光成像 荧光图像 荧光颜色 啶衍生物 羟基喹啉 乙烯基 检测 乙腈 配制 孵化 观察 | ||
【主权项】：
1.一种利用荧光探针在极端pH值下的活性细胞荧光成像方法，其特征是以喹哪啶衍生物(E)‑2‑(2,4‑二羟基苯基)乙烯基‑8‑羟基喹啉，简称探针，作为极端pH值下的活性细胞荧光成像探针，其结构式为：![]()
方法是：(1)用探针乙腈溶液和缓冲溶液配制pH在2～4范围的探针溶液，再将探针与活性细胞孵化后，用荧光显微镜检测，呈现清晰的绿色荧光细胞图像，随pH值的增大，细胞的绿色荧光减弱；(2)用探针乙腈溶液和缓冲溶液配制pH在10～12范围的探针溶液，再将探针溶液与活性细胞孵化后，用荧光显微镜检测，呈现清晰的红色荧光细胞图像，随pH值的增大，细胞的红色荧光增强；(3)用探针乙腈溶液和缓冲溶液配制pH在5～9范围的探针溶液，再将探针与活性细胞孵化后，荧光显微镜检测不到细胞的荧光图像；上述所指极端pH值是指pH2～4、pH10～12。
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