[发明专利]一种从发酵液中提取并纯化米尔贝霉素的方法

摘要

本发明公开了一种从发酵液中提取并纯化米尔贝霉素的方法。首先将米尔贝霉素发酵液絮凝、过滤，得菌丝渣；用非水溶性溶剂萃取菌丝渣，萃取液依次进行酸洗、浓缩、碱处理，再进行二次萃取；然后酸洗、降温沉淀，过滤取滤液上硅胶柱层析；解吸液进行衍生处理，二次硅胶柱层析，结晶，分离，到米尔贝霉素衍生物；将衍生物水解、萃取、浓缩、结晶、干燥，得到米尔贝霉素A3和A4含量大于80％的米尔贝霉素。该方法对生产设备的要求较低，条件温和，简单易操作，获得的米尔贝霉素纯度高，适宜进行规模化生产，经济效益明显。

主权项

1.一种从发酵液中提取并纯化米尔贝霉素的方法，包括以下步骤：1)将米尔贝霉素发酵液进行絮凝、过滤，得到菌丝渣；2)用非水溶性溶剂萃取菌丝渣，得到一次萃取液，所述非水溶性溶剂为醋酸丁酯和/或乙酸乙酯；3)将一次萃取液依次进行酸洗、浓缩、碱处理，然后用二次萃取溶剂萃取，得到二次萃取液，所述二次萃取溶剂为庚烷、己烷、甲苯和/或二甲苯；4)对二次萃取液进行酸洗，降温沉淀，过滤取滤液得一次纯化上柱液；5)用硅胶柱层析分离一次纯化上柱液，收集得一次层析液；6)用衍生试剂、酸束缚剂对一次层析液中的米尔贝霉素进行衍生处理，所述衍生试剂为对硝基苯甲酰氯、邻硝基苯甲酰氯和/或苯甲酰氯，所述酸束缚剂为吡啶、二乙胺和/或三乙胺；然后用碱洗涤，浓缩，结晶，干燥晶体，再将晶体溶解，过滤取滤液得衍生纯化上柱液；7)用硅胶柱层析分离衍生纯化上柱液，收集得二次层析液；8)浓缩二次层析液，结晶，分离，得到米尔贝霉素衍生物晶体；9)将米尔贝霉素衍生物水解、萃取、浓缩、结晶、干燥得到米尔贝霉素A3和A4含量大于80％的米尔贝霉素。