[发明专利]一种SNP分型方法及试剂盒

摘要

本发明涉及DNA检测技术领域，提供了一种SNP分型方法及试剂盒。待测SNP位点包括CYP2C9、VKORC1和CYP2C19基因中的SNP位点，所述SNP分型方法利用无荧光标记的寡核苷酸探针替换有荧光标记的寡核苷酸探针，对待测序文库分子进行一次连接测序反应后，再通过连接测序获得待测SNP位点的序列信息。所述SNP分型试剂盒，包括CYP2C9特异性引物对、VKORC1特异性引物对、CYP2C19特异性引物对、无荧光标记的寡核苷酸探针。本发明的SNP分型方法及试剂盒通过封闭待测序文库分子中的非特异性结合位点，降低了连接测序所得结果中的错误信号，从而提高了SNP位点检测的准确性。

主权项

一种SNP分型方法，其特征在于，待测SNP位点包括CYP2C9、VKORC1和CYP2C19基因中的SNP位点，所述SNP分型方法包括以下步骤：A、含待测SNP位点核酸片段的获得：利用CYP2C9特异性引物对、VKORC1特异性引物对和CYP2C19特异性引物对分别对待测样本进行PCR扩增，得CYP2C9扩增产物、VKORC1扩增产物和CYP2C19扩增产物；B、待测序文库分子的构建：将CYP2C9扩增产物、VKORC1扩增产物和CYP2C19扩增产物分别与接头连接，形成相应的待测序文库分子，并将待测序文库分子通过微球可寻址的固定在固相载体上；C、封闭非特异性结合位点：利用无荧光标记的寡核苷酸探针替换有荧光标记的寡核苷酸探针，对固定在固相载体上的待测序文库分子进行一次连接测序反应；D、连接测序获得待测SNP位点的序列信息。