[发明专利]一种魔芋甘露聚糖肽的制备方法

摘要

本发明提供了一种魔芋甘露聚糖肽的制备方法，以魔芋飞粉为原料，通过耐热解蛋白芽孢杆菌和短小芽孢杆菌共发酵制备魔芋多肽；采用硫酸铵分级沉淀法提取魔芋多肽中可溶性糖肽；然后将透析除盐后的粗糖肽依次通过DEAE-纤维素柱层析和凝胶柱层析进行分离纯化；最后采用亲和层析的方法得到纯化的魔芋甘露聚糖肽。本发明填补了以魔芋飞粉为原料结合发酵法、硫酸铵分级沉淀和色谱技术制备魔芋甘露聚糖肽的技术空白，同时也为魔芋飞粉的开发利用，生产高附加值产品开辟了一条新的道路，在食品、医药等领域具有重要意义。

主权项

一种魔芋甘露聚糖肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)发酵：向每100mL培养基中加入魔芋飞粉1～4g，采用耐热解蛋白芽孢杆菌和短小芽孢杆菌共生发酵，发酵完成后，发酵液经离心后去除菌体，取上清液，向其中加入1～5倍于上清液体积的纯化水，然后用三氯乙酸调节pH值至3.8～4.2，静置后去除沉淀，去除沉淀后得到的上清液即为魔芋糖肽液；2)硫酸铵分级沉淀：向魔芋糖肽液中加入硫酸铵晶体，使硫酸铵的饱和度达到20～80％，然后静置、离心，离心得到的沉淀用pH＝7～9的Tris‑Hcl缓冲液溶解，再经透析后得到可溶性糖肽；3)用DEAE‑52纤维素柱层析和SephadexG‑100凝胶柱层析依次对可溶性糖肽进行分离纯化，得到魔芋甘露聚糖肽粗品；4)将魔芋甘露聚糖肽粗品进行ConA‑Sepharose4B亲和柱层析，即得到纯化的魔芋甘露聚糖肽。