[发明专利]一种NK细胞的诱导培养方法有效
申请号: | 201510897188.9 | 申请日: | 2015-12-07 |
公开(公告)号: | CN105296426B | 公开(公告)日: | 2018-12-04 |
发明(设计)人: | 陈海佳;王一飞;葛啸虎;曾维杰 | 申请(专利权)人: | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 赵青朵 |
地址: | 510000 广东省广州市国*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及生物技术领域,公开了一种NK细胞的诱导培养方法。本发明所述方法先制备细胞三维培养载体;然后从外周血分离出单个核细胞并接种到细胞三维培养载体中,同时补加IL‑2、IL‑15、IL‑21以及OKT‑3因子诱导培养,定期补液。本发明在NK细胞的诱导培养引入了细胞三维培养载体进行诱导培养,同时配合细胞因子的加入,由此解决了传统培养方法扩增的数量有限、表面抗原CD3‑/CD56+的表达水平较低、细胞杀伤活性不高的问题,满足临床上对于NK细胞的需求。 | ||
搜索关键词: | 一种 nk 细胞 诱导 培养 方法 | ||
【主权项】:
1.一种NK细胞的诱导培养方法,其特征在于,包括:步骤1、用X‑VIVO 15培养液稀释Matrigel基质,于细胞培养容器中孵育包被,获得细胞三维培养载体;步骤2、从外周血分离出单个核细胞并接种到步骤1中的载体中,同时补加IL‑2、IL‑15、IL‑21以及OKT‑3因子诱导培养,定期补液;其中,所述X‑VIVO 15培养液稀释Matrigel基质的比例为5:1,所述各因子的浓度为:100~1000U/mL IL‑2、10~100ng/mL IL‑15、10~100ng/mL IL‑21、50~100ng/mL OKT‑3。
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