[发明专利]铜皮石斛的组织培养方法

摘要

本发明公开了一种铜皮石斛的组织培养方法，包括：步骤一、取铜皮石斛果荚作为外植体进行消毒；步骤二、外植体萌发获得无菌试管苗；步骤三、将无菌试管苗培养得到试管苗丛生芽；步骤四、将试管苗丛生芽置于壮苗培养基中，在壮苗培养基中培养得到试管苗；步骤五、将试管苗置于生根培养基中得到组培苗；步骤六、炼苗后将组培苗移栽至基质中培养。采用本发明的培养方法得到的铜皮石斛丛生芽增殖系数达到20～30倍，本发明能在短时间内提供健壮的铜皮石斛优质种苗，有效解决铜皮石斛的规模化育苗问题。

主权项

一种铜皮石斛的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、取铜皮石斛的果荚进行消毒和预处理，用体积分数为2％的洗洁精水溶液浸泡5min后，用流水冲洗15～30min，然后将铜皮石斛的果荚灼烧2次，每次灼烧5～10s后，得到外植体；步骤二、将所述外植体切开，取出种子后接种到第一培养基中，在所述第一培养基中培养50～70天后得到无菌试管苗；所述第一培养基中包括：MS、0.5mg/L赤霉素和2.0g/L活性炭；步骤三、将所述无菌试管苗置于第二培养基中，在所述第二培养基中培养50～70天后得到试管苗丛生芽；所述第二培养基中包括：MS、0.5～2.0mg/L的甲巯达嗪、0.2～1.5mg/L的2，4‑二氯苯氧乙酸和0.2～0.5mg/L的激动素；步骤四、将所述试管苗丛生芽置于壮苗培养基中，在所述壮苗培养基中培养20～40天后得到试管苗；所述壮苗培养基中包括：花宝2号培养基、1.0～4.0mg/L的6‑苄氨基腺嘌呤和1.0～4.0mg/L的萘乙酸；步骤五、将所述试管苗置于生根培养基中，在所述生根培养基中培养30～50天后得到组培苗；所述生根培养基中包括：1/2MS和20g/L的香蕉泥，所述香蕉泥为将香蕉搅碎后得到。