[发明专利]一种利用芽孢杆菌生产抗氧化肽的发酵方法及应用

摘要

一种利用芽孢杆菌生产抗氧化肽的发酵方法及其应用：包括：步骤1、制备发酵多肽液，原料烘干；打碎；脱脂处理；脱脂后的处理：使用0.22μm规格的滤膜将原料过滤除去脂肪后，在70℃下将原料烘24h备用；加pH为6.8、0.05mol/L的磷酸缓冲液灭菌；接种，种子液培养基；步骤2、对步骤1中发酵多肽液进行纯化；当过滤至发酵液体积剩下原体积的1/5时，补加蒸馏水至原体积；此时收集滤过液并分别取滤过液和截留液适量进行多肽含量的测定，测定方法采用双缩脲法；重复补水几次并分别测定滤过液和截留液中的多肽含量，直到截留液以及滤过液中多肽含量相对恒定，即可认为小分子肽已经被滤过，而大分子肽被截流。

主权项

一种利用芽孢杆菌生产抗氧化肽的发酵方法：其特征在于，包括如下步骤：步骤1、制备发酵多肽液，具体为：原料烘干；打碎；脱脂处理；脱脂后的处理：使用0.22μm规格的滤膜将原料过滤除去脂肪后，在70℃下将原料烘24h备用；加pH为6.8、0.05mol/L的磷酸缓冲液灭菌；接种，种子液培养基：牛肉膏0.3％，蛋白胨1％，氯化钠0.5％，pH7.0；接种量2％；发酵；90℃，10min灭酶；5000r/min离心，20min；步骤2、对步骤1中发酵多肽液进行纯化，具体为：4000r/min，20min发酵液依次经过离心，三层滤纸过滤，0.22μm滤膜过滤澄清后，取适量发酵液进行超滤转数为200rpm，依次使用截留分子质量为5kd和3kd的膜包进行超滤；当过滤至发酵液体积剩下原体积的1/5时，补加蒸馏水至原体积；此时收集滤过液并分别取滤过液和截留液适量进行多肽含量的测定，测定方法采用双缩脲法；重复补水几次并分别测定滤过液和截留液中的多肽含量，直到截留液以及滤过液中多肽含量相对恒定，则小分子肽已经被滤过，而大分子肽被截流。