[发明专利]采用兼并引物复合扩增21个短串联重复序列的试剂盒

摘要

采用兼并引物复合扩增21个短串联重复序列的试剂盒，一种同时分析多个STR基因座的复合扩增系统，在一个复合扩增反应体系中同时扩增21个基因座，分为下述四组：第一组为D19S433、TH01、D21S11、D18S51和Penta E；第二组为D3S1358、D13S317、D7S820、D5S818、CSF1PO和Penta D；第三组为Amelogenin、vWA、D8S1179、TPOX、D6S1043和D1S1656；第四组为D16S539、D12S391、D2S1338、FGA；在基因座重复序列的侧翼分别设计特异性引物，使得基因座组内各个片段峰值均衡性达到40％以上，将上述四组基因座复合扩增，调整各基因座引物浓度，使各基因座峰值整体均衡性达到30％以上。本发明容易得到均衡稳定的复合扩增结果，是一种低成本高效率的复合扩增体系。

主权项

一种同时分析多个STR基因座的复合扩增系统，其特征在于：在一个复合扩增反应体系中同时扩增21个基因座：Amelogenin、vWA、D21S11、D18S51、D5S818、D7S820、D13S317、D16S539、FGA、D2S1338、D19S433、D6S1043、D12S391、D8S1179、D3S1358、D1S1656、CSF1PO、Penta D、Penta E、TH01和TPOX；所述的基因座分为下述四组，每组分别由不同荧光素标记：第一组为D19S433、TH01、D21S11、D18S51和Penta E；第二组为D3S1358、D13S317、D7S820、D5S818、CSF1PO和Penta D；第三组为Amelogenin、vWA、D8S1179、TPOX、D6S1043和D1S1656；第四组为D16S539、D12S391、D2S1338、FGA；针对上述分组在基因座重复序列的侧翼分别设计特异性引物所述，使得基因座组内各个片段峰值均衡性达到40％以上，引物分为如下组合：引物第一组为SEQ ID NO：1‑10；引物第二组为SEQ ID NO：11‑22；引物第三组为SEQ ID NO：23‑34；引物第四组为SEQ ID NO：35‑42；将上述四组基因座复合扩增，根据产物峰高情况调整各基因座引物浓度，使各基因座峰值整体均衡性达到30％以上。