[发明专利]一种莲瓣兰的组织培养方法及其应用

摘要

本发明公开了一种莲瓣兰的组织培养方法及其应用。本发明将莲瓣兰无菌苗茎尖为外植体，采用增殖培养基诱导根状茎增殖，以LED作为组织培养光源，用蓝光培育；接着将得到的根状茎移至继代生长培养基，诱导丛生芽生长和快速成苗，以LED作为组织培养光源，用红光培育；将新生成苗接至生根培养基进行壮苗生根培养，以LED作为组织培养光源，用按比例2～4：6～8配比红光混合蓝光培育。本发明有效解决以往组织培养技术中存在的出芽率低，生长缓慢，生根难等问题；且使用LED灯具作为组织培养光源，有节省用电资源30-50％，降低了成本，并提高了工厂化生产的效率。

主权项

一种莲瓣兰的组织培养方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将莲瓣兰无菌苗茎尖为外植体，采用增殖培养基诱导根状茎增殖和丛生芽分化，培养条件如下：以LED作为组织培养光源，蓝光440～480nm，光强20～40μmo1·m^‑2·s^‑1，光周期12～16h/d培养40～80天；增殖培养基的组成为：1/2MS培养基、6‑BA 1.5～3.5mg/L、NAA 0.1～0.3mg/L、蔗糖10～30g/L、活性炭0.5～1g/L、琼脂6～8g/L，pH＝5.6～5.8；(2)将步骤(1)得到的根状茎移至继代生长培养基，诱导丛生芽生长和快速成苗，培养条件如下：以LED作为组织培养光源，红光620～660nm，光强20～40μmo1·m^‑2·s^‑1，光周期12～16h/d培养30～60天；继代生长培养基的组成为：1/2MS培养基、6‑BA 0.1～1.0mg/L、NAA 0.1～0.3mg/L、蔗糖10～30g/L、活性炭0.5～1g/L、琼脂6～8g/L，pH＝5.6～5.8；(3)将新生成苗接至生根培养基进行壮苗生根培养，培养条件如下：以LED作为组织培养光源，波长为620～660nm红光和波长为440～480nm的蓝光按比例2～4：6～8配比，光强30～60μmo1·m^‑2·s^‑1，光周期12～16h/d培养30～60天；生根培养基的组成为：1/2MS培养基、6‑BA 0.1～0.3mg/L、NAA 0.2～0.5mg/L、蔗糖10～30g/L、活性炭0.5～1g/L、琼脂6～8g/L，pH＝5.6～5.8。