[发明专利]一种水体中氯霉素CAP的定量检测方法

摘要

本发明公开了一种水体中氯霉素CAP的定量检测方法，先制备免疫光谱标记处理的贵金属微粒A溶液，再制备修饰有CAP抗体的磁性微粒B溶液，然后制备一系列浓度梯度的CAP样品液，将A溶液和一系列浓度梯度的CAP样品液滴到B溶液中，则样品液中的CAP和溶液A中的CAP‑BSA同时与溶液B中的CAP抗体特异性结合；随后利用磁场分离磁性结合物，保留上清液，采集上清液中残留的贵金属微粒上拉曼信号示踪分子的信号，根据样品液中CAP浓度和拉曼信号强度的对应关系，绘制标准曲线，从而检测待测水样品中CAP的浓度，该方法条件温和、操作简便，检测过程快速，检测结果准确，灵敏度高，可以实现对痕量氯霉素的定量分析。

主权项

1.一种水体中氯霉素CAP的定量检测方法，其特征是包括以下步骤：(1)将拉曼信号示踪分子和CAP‑BSA结合到贵金属微粒表面，制备成免疫光谱标记处理的贵金属微粒A溶液，其中BSA为牛血清白蛋白；所述的拉曼信号示踪分子为4,4'‑联吡啶；(2)采用活化剂活化表面修饰有羧基的磁性微粒，随后加入CAP抗体，制备成修饰有CAP抗体的磁性微粒B溶液；(3)选取CAP标准溶液，用三蒸水稀释制成一组具有浓度梯度的样品液；(4)将步骤(1)中的A溶液和步骤(3)的一组具有浓度梯度的样品液中的每一份分别加入到步骤(2)得到的B溶液中，则样品液中的CAP和A溶液中的CAP‑BSA同时与溶液B中的CAP抗体特异性结合；所述的A溶液的浓度为0.95～1.05mmol/L，其与样品液的体积比为4.5～5.5：1，所述的B溶液的浓度为0.4～0.6mg/mL，其与所述的A溶液的体积比为1：1.0～1.25；(5)利用磁场分离磁性结合物，保留上清液，用显微拉曼光谱仪对上清液中残留的贵金属微粒上拉曼信号示踪分子进行信号采集，根据步骤(3)的样品液中CAP浓度和拉曼信号强度的对应关系，绘制标准曲线；(6)取待测水样品，经过滤、离心除杂，并用三蒸水稀释以消除基质影响后，根据该待测水样品获得的拉曼光谱信号强度，代入步骤(5)中的标准曲线读出CAP的浓度，乘以相应的稀释倍数即为待测水样品中CAP的浓度。