[发明专利]一种灵芝菌种提纯复壮的方法

摘要

本发明涉及微生物菌种选育技术领域，尤其是一种灵芝菌种提纯复壮的方法。具体采用三代及三代以内的健壮的灵芝个体组织分离提取母种，充分考虑灵芝菌种在培植生产的不同阶段对营养需求的变化，利用不同的培养基，逐步进行菌种的初次筛选培养、第二次培养、第三次培养、第四次培养、扩展原种培养、扩转生产种培养、以及车间的规模化生产应用，有效解决灵芝菌种在长期传代培养导致的菌种退化问题，提高灵芝菌种生产的生物转换率、降低污染报废率，为灵芝的规模化可持续性生产提供了菌种保障。

主权项

一种灵芝菌种提纯复壮的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)菌种的初次筛选培养：采用三代及三代以内的健壮的灵芝个体组织分离提取母种，以琼脂或小米配合马铃薯为培养基，常规斜面培养10～15天，再置于超低温‑80～‑50℃保藏；(2)第二次培养：选取步骤(1)培养的灵芝菌种，以小米粉与栎树(Quercus Linn)叶汁为培养基，常规斜面培养10～15天，再进行超低温保藏；(3)第三次培养：选取步骤(2)培养的灵芝菌种，以小米粉与栎树叶粉为培养基，常规斜面培养10～15天，再进行超低温保藏；(4)第四次培养：选取步骤(3)培养的灵芝菌种，以栎树叶粉、Vb1和水为培养基，常规斜面培养，当菌丝生长满试管时停止培养，再进行超低温保藏；(5)扩展原种：选取步骤(4)培养的灵芝菌种，以含栎树木屑与麦麸或米糠的混合物为培养基，使用广口瓶、棉塞常规培养18～25天，然后更换棉塞为四层医用纱布封罩瓶口，继续培养10～20天并保藏；(6)扩转生产种：选取步骤(5)培养的灵芝菌种，以含栎树木屑与麦麸或米糠的混合物为培养基，经蒸汽灭菌、分袋、接种，并加扎外袋罩护，常规培养，当接种孔发菌直径8～10cm后覆膜去外罩护袋，继续常规培养，一共培养30～40天并保藏；(7)应用生产：将步骤(6)培养的灵芝菌种用于车间规模化生产。