[发明专利]一种人免疫球蛋白制品中Tau蛋白抗体含量的检测方法在审
申请号: | 201510971526.9 | 申请日: | 2015-12-22 |
公开(公告)号: | CN105388302A | 公开(公告)日: | 2016-03-09 |
发明(设计)人: | 叶生亮;曹海军;李长清;马莉;杜晞;王宗奎 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院输血研究所 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 成都九鼎天元知识产权代理有限公司 51214 | 代理人: | 房云 |
地址: | 610052 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | 本发明提供了一种人免疫球蛋白制品中Tau蛋白抗体含量的检测方法,属于生物医药检测技术领域,其包括以下步骤:A.抗原包被;B.封闭;C.一抗孵育;D.二抗孵育;E.酶标三抗孵育;F.吸光度检测及含量计算步骤。该检测方法通过步骤B中选用的无蛋白封闭液而避免了常规封闭液中的蛋白质与待测样品中的多元抗体发生非特异性结合而影响检测结果;通过步骤C、D中使用去除了免疫球蛋白的牛血清白蛋白配制样品稀释液,避免了牛血清白蛋白中残留的IgG分子与检测体系发生交叉反应的影响;通过步骤C、步骤D和步骤E的生物素放大系统对待测样品中的Tau蛋白抗体的检测信号进行了放大,因此,本检测方法能够更准确测定人免疫球蛋白制品中Tau蛋白抗体含量。 | ||
搜索关键词: | 一种 免疫球蛋白 制品 tau 蛋白 抗体 含量 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种人免疫球蛋白制品中Tau蛋白抗体含量的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:A.抗原包被:在酶标板的每孔中加入Tau蛋白溶液,经孵育操作后用洗涤液洗涤;B.封闭:在所述酶标板的每孔中加入无蛋白封闭液,经孵育操作后用洗涤液洗涤;C.一抗孵育:在所述酶标板的每孔中加入待测样品,经孵育操作后用洗涤液洗涤;所述待测样品为用稀释液稀释的人免疫球蛋白制品,所述稀释液为采用去免疫球蛋白G的牛血清白蛋白和磷酸钠‑吐温缓冲液配制的混合液,所述稀释液中的去免疫球蛋白G的牛血清白蛋白的质量含量为0.5%‑1.5%;D.二抗孵育:在所述酶标板的每孔中加入生物素偶联的抗一抗的抗体,经孵育操作后用洗涤液洗涤;E.酶标三抗孵育:在所述酶标板的每孔中加入标记酶偶联的链抗生物素蛋白,经孵育操作后用含有NaCl和Tween‑20的Tris‑HCl缓冲液洗涤;F.吸光度检测及含量计算:在所述酶标板的每孔中加入显色底物进行显色反应,经孵育操作后再加入终止液终止反应,然后将所述酶标板放入检测装置中进行吸光度检测,得待测样品的吸光度值OD待测样品,并采用标准曲线法计算出待测样品中的Tau蛋白抗体的含量。
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