[发明专利]一种脂肪体的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种脂肪体的制备方法及其应用。本发明所提供的一种制备由中性脂质和单层磷脂膜组成的脂肪体的方法，包括下述步骤：a1)将磷脂和中性脂质在缓冲液中进行涡旋以实现两者的反应，然后进行离心，收集上层液相；a2)将步骤a1)得到的上层液相进行两次以上的纯化；每次纯化的方法为：将上层液相与所述缓冲液混匀，然后使其分层，收集上层液相；a3)将步骤a2)得到的上层液相与所述缓冲液混合，然后使其分层，收集下层液相，其中含有脂肪体。利用本发明提供的方法制备的脂肪体，可招募一种或几种固有蛋白和/或功能蛋白、获得人工脂滴，可招募一种或几种载脂蛋白、获得人工脂蛋白，均在制备药物和/或药物载体中具有重要作用。

主权项

1.一种制备由中性脂质和单层磷脂膜组成的脂肪体的方法，包括下述步骤：a1）将磷脂和中性脂质在缓冲液中进行涡旋 以实现两者的反应，然后进行离心，收集上层液相，从上层液相中分离得到脂肪体；所述“从上层液相中分离得到脂肪体”包括如下步骤：a2）将所述上层液相进行两次以上的纯化；每次纯化的方法为：将上层液相与所述缓冲液混匀，然后使其分层，收集上层液相；a3）将步骤a2）得到的上层液相与所述缓冲液混合，然后使其分层，收集下层液相，其中含有脂肪体；所述步骤a2）中，所述“使其分层”是通过离心实现的，所述离心的参数为：18000～22000g、3～7min；所述步骤a3）中，所述“使其分层”是通过离心实现的，所述离心的参数为：800～1200g、3～7min；所述磷脂为b1）、b2）或b3）：b1）1，2‑二‑（9Z‑十八碳烯酰基）‑sn‑甘油‑3磷酸胆碱；b2）1，2‑二‑（9Z‑十八碳烯酰基）‑sn‑甘油‑3磷酸胆碱和1，2‑二‑（9Z‑十八碳烯酰基）‑sn‑甘油‑3磷酸乙醇胺；b3）1，2‑二‑（9Z‑十八碳烯酰基）‑sn‑甘油‑3磷酸胆碱和1，2‑二‑十八碳烷酰基‑sn‑甘油‑3‑磷酸胆碱；所述b2）中，1，2‑二‑（9Z‑十八碳烯酰基）‑sn‑甘油‑3磷酸胆碱和1，2‑二‑（9Z‑十八碳烯酰基）‑sn‑甘油‑3磷酸乙醇胺的质量比为1:0.01～2；所述b3）中，1，2‑二‑（9Z‑十八碳烯酰基）‑sn‑甘油‑3磷酸胆碱和1，2‑二‑十八碳烷酰基‑sn‑甘油‑3‑磷酸胆碱的质量比为1:0.01～2；所述中性脂质为c1）或c2）：c1）甘油三酯；c2）胆固醇油酸酯和甘油三酯；所述c2）中，胆固醇油酸酯和甘油三酯的质量比为1～5：1；所述磷脂和所述中性脂质的质量比0.25～3:5。