[发明专利]一种β-羟丁酸的测定方法及其测定试剂盒在审
| 申请号： | 201510981872.5 | 申请日： | 2015-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN105510255A | 公开（公告）日： | 2016-04-20 |
| 发明（设计）人： | 孟广宇;吉爽爽;李丰盛 | 申请（专利权）人： | 江苏迈源生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/31 | 分类号： | G01N21/31 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 225100 江苏省扬州市邗江区*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及β-羟丁酸的循环酶测定方法及其测定试剂盒，利用β-羟丁酸脱氢酶与硫代氧化型辅酶Ⅰ特异性氧化β-羟丁酸，生成乙酰乙酸和硫代还原型辅酶Ⅰ。乙酰乙酸在β-羟丁酸脱氢酶及还原型辅酶Ⅰ存在下，又生成β-羟丁酸和氧化型辅酶Ⅰ。反应循环进行，产生大量的硫代还原型辅酶Ⅰ，通过在波长405nm条件下测定生成的硫代还原型辅酶的吸光度上升量率，可计算出β-羟丁酸含量，该方法对微量的β-羟丁酸起放大作用，具有灵敏度高、稳定性好、成本低等优点。该试剂盒由还原型辅酶、β-羟丁酸脱氢酶、硫代氧化型辅酶Ⅰ、缓冲液、表面活性剂和稳定剂组成。本发明可通过生化分析仪测定β-羟丁酸含量。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 丁酸 测定 方法 及其 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种β‑羟丁酸的测定方法，其特征在于：样本中的β‑羟丁酸被β‑羟丁酸脱氢酶和硫代氧化型辅酶Ⅰ（Thio‑NAD+）特异性氧化，生成乙酰乙酸和硫代还原型辅酶Ⅰ（Thio‑NADH）；乙酰乙酸在β‑羟丁酸脱氢酶及还原型辅酶Ⅰ（NADH）存在下，又生成β‑羟丁酸和氧化型辅酶Ⅰ（NAD＋），反应循环进行，产生大量的硫代还原型辅酶Ⅰ（Thio‑NADH），通过405nm波长下测定生成的Thio‑NADH的吸光度变化来定量样本中的β‑羟丁酸含量，其反应方程式如下：![]()
该方法对样本中微量的β‑羟丁酸起放大作用，β‑羟丁酸的计算公式如下：![]()
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