[发明专利]一种提取甘露聚糖肽的方法有效
申请号: | 201510987508.X | 申请日: | 2015-12-27 |
公开(公告)号: | CN105349607B | 公开(公告)日: | 2019-07-16 |
发明(设计)人: | 钱金宏;王进波;卢晓会;齐莉莉;汪修武;张晓龙;金芹;钱勇;陈小利;黄代勇 | 申请(专利权)人: | 宁波拜尔玛生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34 |
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地址: | 315000 浙江省宁波市高新区光*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种提取甘露聚糖肽的方法,包括:步骤A,采用α‑淀粉酶和糖化酶酶解魔芋飞粉;步骤B,将步骤A得到的酶解液用碱液提取;步骤C,将步骤B得到的飞粉蛋白液进行预超滤分离,除去小分子糖;步骤D,对步骤C得到的预超滤截留液加入蛋白酶进行一级同步酶解超滤;步骤E,对步骤D制备得到的滤出液进行二级超滤分离滤出蛋白酶;步骤F,将步骤E得到的截留液浓缩干燥,得到甘露聚糖肽提取物。本发明最终获得的魔芋飞粉甘露聚糖肽的提取率达2~3%,纯度达70~75%。本发明将酶解过程和多级超滤串联同步连续进行,可提高生产效率。本发明无需酶解反应后的灭酶过程,且蛋白酶可循环重复利用,提高了酶的利用率,节能环保。 | ||
搜索关键词: | 一种 高效 提取 甘露 聚糖 方法 | ||
【主权项】:
1.一种提取甘露聚糖肽的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤A:采用α‑淀粉酶和糖化酶酶解魔芋飞粉原料,去除魔芋飞粉中的淀粉,得到飞粉酶解液;步骤B:用碱液提取步骤A得到的飞粉酶解液中的蛋白,得到飞粉蛋白液;步骤C:使用截留分子量为2,000Da的中空纤维式超滤膜对步骤B得到的飞粉蛋白液进行预超滤分离,除去小分子糖,得到预超滤截留液;步骤D:同步酶解一级超滤,在步骤C得到的预超滤截留液中加入蛋白酶,得到截留液‑蛋白酶混合液,同时将所述截留液‑蛋白酶混合液通过第一超滤柱2进行一级超滤分离,得到截留液I和滤出液I;所述第一超滤柱2包含截留分子量为XDa的中空纤维式超滤膜;步骤E:酶解液二级超滤,使步骤D得到的滤出液I通过温控容器3进入第二超滤柱4进行超滤分离,得到截留液II和滤出液II;所述第二超滤柱4包含截留分子量为YDa的中空纤维式超滤膜;所述步骤D中,第一超滤柱2的超滤条件:压力0.02~0.1Mpa,温度20~70℃;pH值为7~10;膜通量为1~20升/小时;所述步骤E中,第二超滤柱4的超滤条件:压力0.02~0.1Mpa;温度5~15℃;pH值为7~10;膜通量为1~20升/小时;所述步骤E与所述步骤D同步连续进行,所述步骤D中得到的截留液I回到进料容器1后再进入所述第一超滤柱2循环往复进行一级超滤分离;所述步骤E中得到的截留液II回到温控容器3后再进入第二超滤柱循环往复进行二级超滤分离;所述步骤E中得到的滤出液II是包含有蛋白酶的滤出液,所述蛋白酶的分子量为ZDa;所述含有蛋白酶的滤出液收集到酶液收集器中后可以重新添加到进料容器1中使用;步骤F:将所述温控容器3中最终收集到的超滤产物浓缩干燥,得到甘露聚糖肽提取物;上述技术方案中,200,000Da>X>Y>Z>2,000Da;X为80,000Da,Y为50,000Da,Z为27,000Da。
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