[发明专利]一种重组表达人谷氨酸脱羧酶的毕赤酵母基因工程菌在审
| 申请号： | 201510997621.6 | 申请日： | 2015-12-28 |
| 公开（公告）号： | CN105400813A | 公开（公告）日： | 2016-03-16 |
| 发明（设计）人： | 刘立明;罗秋玲;刘佳 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N1/19;C12N9/88;A61K38/51;A61P3/10;C12R1/84 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 耿晓岳 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种重组表达人谷氨酸脱羧酶的毕赤酵母基因工程菌，属于基因工程技术领域。本发明将人谷氨酸脱羧酶基因GAD65与载体pPICZα连接构建表达载体pPICZα-hGAD65，电转至毕赤酵母X-33中，获得过量表达人谷氨酸脱羧酶(GAD65)的重组菌株。本发明的重组菌株经摇瓶发酵、Tricine-SDS-PAGE和Western Blot鉴定，证实人源谷氨酸脱羧酶(GAD65)实现了诱导表达，通过对发酵上清液进行分离纯化得到融合蛋白，经过蛋白浓度测定，蛋白hGAD65浓度达到2.36g/L。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 表达 谷氨酸 脱羧酶 酵母 基因工程 | ||
【主权项】：
一种高效活性表达人的谷氨酸脱羧酶的方法，其特征在于，所述方法是构建以毕赤酵母为宿主表达核苷酸序列如SEQ ID NO:1所述的谷氨酸脱羧酶的重组菌，然后以该重组菌发酵生产人的谷氨酸脱羧酶。
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