[发明专利]EMS离体诱变提高火龙果抗寒性的方法

摘要

本发明公开了一种EMS离体诱变提高火龙果抗寒性的方法。本发明以从火龙果成熟枝条上诱导的无菌幼苗为试材，通过EMS诱变处理，对成活的幼苗施加HYP选择压，通过选择压能够成活的幼苗再经低温诱导，获得的了火龙果无菌幼苗具有良好的抗寒能力。这样的方法不仅有利于保存母本的优良性状和后代的遗传稳定性。同时采用离体诱导，操作条件可控，突变率相对较高，为火龙果的抗寒新品种选育及寻找提高抗寒性的新途径提供重要的理论依据和参考。本发明简单易行，成本低廉，使用效果好。

主权项

一种EMS离体诱变提高火龙果抗寒性的方法，其特征在于：包括如下步骤：1）以从火龙果成熟茎段上培育的单个无菌苗为试材，将试材浸泡在体积浓度为3.71‑3.95%的EMS处理液中，使试材与EMS处理液完全接触，处理期间经常摇动，使溶液与无菌苗均匀接触，处理时间为8.26‑9.32小时；2）在步骤1）的处理时间完毕后，用无菌水冲洗5次以上，去除毒性，吸干表面水份，将单株苗接种于继代培养基上恢复生长25‑35d，促进其生长分化；3）在步骤2）中将恢复生长后分化出的不定芽进行HYP逐步筛选，在最大耐受浓度为20 mmol/L的HYP的培养基中培养筛选12‑18d后，存活的芽继续接入含有20 mmol/L的HYP的选择培养基中培养18‑25d；再将存活的材料转入不含HYP的培养基中培养18‑25d；4）在步骤3）中最后存活的材料在0‑4℃下进行低温诱导7‑24 d，从而增强火龙果的抗寒性。