[发明专利]灯盏花甲素的制备方法

摘要

本发明提供了一种灯盏细辛制备灯盏花甲素的方法，采用醇或者水回流提取，大孔吸附柱层析富集，制备高效液相色谱纯化的工艺流程。具有成本低，易操作，高含量的特点；本发明的方法适用于工业级生物医药用液相制备色谱装置，以实现高纯度灯盏花甲素的工业化生产。

主权项

1.一种灯盏花甲素的制备方法，包括如下步骤：(1)灯盏细辛加入50‑80％乙醇或水回流提取2‑3次，该百分比为体积百分比，合并提取液，减压浓缩成浸膏；(2)将灯盏细辛浸膏用浓度为0.1‑20％的稀碱溶液溶解至pH 7‑10之间，使浸膏溶解后，过滤；滤液加酸调pH值至1‑3，静置后过滤；得到沉淀；(3)将沉淀用碱溶解，调节pH值6‑9之间，上苯乙烯型大孔树脂层析柱，用水冲洗，分别接收洗脱液，以液相检测，收集灯盏花甲素相对含量大于60％及以上的馏分,将含有灯盏花甲素的洗脱液部分减压浓缩成清膏；(4)将含有灯盏花甲素的清膏上制备液相柱，所述制备液相柱为C18反相硅胶填充柱，以有机溶剂和含有酸的水作为流动相，进行纯化分离，收集灯盏花甲素纯品，有机溶剂为甲醇，乙醇或者乙腈中的一种，含酸的水相为0.5％甲酸的水、0.1％甲酸的水或1％乙酸的水的一种，梯度洗脱条件为：以62:38的含0.5％甲酸的水‑甲醇为流动相，检测波长335nm，流速40ml/min，收集20‑30分钟馏分；或者以82:18的含0.1％甲酸的水‑乙腈为流动相，检测波长280nm，流速30ml/min，收集26‑38分钟馏分；或者以50:50的含1％乙酸的水‑甲醇为流动相，检测波长335nm，流速50ml/min，出峰时间18min；收集18‑28分钟馏分；该馏分为灯盏花甲素纯品。