[发明专利]胸苷激酶1的荧光免疫层析检测方法及试剂盒在审

专利信息
申请号: 201511020024.4 申请日: 2015-12-31
公开(公告)号: CN105675867A 公开(公告)日: 2016-06-15
发明(设计)人: 张鹏;张金林;张华;廖平璋 申请(专利权)人: 苏州市博纳泰科生物技术有限公司
主分类号: G01N33/573 分类号: G01N33/573;G01N33/577
代理公司: 北京同辉知识产权代理事务所(普通合伙) 11357 代理人: 刘洪勋
地址: 215123 江苏省苏州市工*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明涉及胸苷激酶1的荧光免疫层析检测方法及其检测试剂盒。该方法步骤为探针固定垫制备、免疫层析试纸条制备、样品稀释液制备和样品检验,其中,将胸苷激酶1单克隆抗体荧光胶乳微粒与羊抗兔IgG荧光胶乳微粒混合后经金稀释液稀释喷在玻璃纤维上制得探针固定垫,并将胸苷激酶1单克隆抗体包被在检测线上,将羊抗兔IgG包被在控制线上进而制得免疫层析试纸条。本发明检测试剂盒包括免疫层析检测卡,其包括PVC衬板、样品垫、探针固定垫、硝酸纤维素膜和吸水纸,该探针固定垫由胸苷激酶1单克隆抗体荧光胶乳微粒和羊抗兔IgG荧光胶乳微粒混合干燥制得。因此,本发明具有检测灵敏度高、准确度高、操作简单、成本低的优点。
搜索关键词: 激酶 荧光 免疫 层析 检测 方法 试剂盒
【主权项】:
一种胸苷激酶1的荧光免疫层析检测方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1)探针固定垫制备:将胸苷激酶1单克隆抗体按比例与活化白蛋白荧光胶乳微粒偶联反应制得胸苷激酶1单克隆抗体荧光胶乳微粒,再将所述胸苷激酶1单克隆抗体荧光胶乳微粒与羊抗兔IgG荧光胶乳微粒按一定比例混合得到混合荧光胶乳微粒,所述混合荧光胶乳微粒用荧光探针微球稀释液稀释后喷在玻璃纤维上制得探针固定垫;步骤2)免疫层析试纸条制备:将样品垫、探针固定垫、层析膜、吸水纸依次贴在PVC衬板上,将所述胸苷激酶1单克隆抗体包被在层析膜的检测线上,将羊抗兔IgG包被在层析膜控制线上,进而制得免疫层析试纸条;步骤3)样品稀释液制备:将包括有牛血清白蛋白、表面活性剂、分散剂和防腐剂的混合物与缓冲液混合均匀制得样品稀释液;步骤4)样品检验:取血清、血浆或全血样品混合至所述样品稀释液,加入免疫层析试纸条进行免疫层析反应,层析反应结束后经荧光检测器荧光检测。
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